[发明专利]一种红霉素菌渣中红霉素A的液质联用检测方法

权利要求书

1.一种红霉素菌渣中红霉素A的液质联用检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)使用提取剂溶解红霉素菌渣中的残留成分，得到供试品溶液；所述提取剂为有机溶剂和水的混合溶剂，所述有机溶剂的体积比为50～100％；

(2)红霉素A标准品溶液的配制；

(3)采用超高效液相色谱-串联质谱检测供试品溶液和标准品溶液，得到供试品溶液和标准品溶液的谱图，计算菌渣中红霉素A的含量；

其中，色谱条件为：色谱柱为C18柱；流动相包括弱极性相和强极性相，所述弱极性相选自甲醇或乙腈，强极性相选自甲酸水溶液、乙酸水溶液、甲酸-甲酸铵溶液或乙酸-乙酸铵溶液，其中酸含量为0.01％～0.5％(v/v)，铵盐浓度为0.01M～0.20M。

2.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙腈或丙酮。

3.按照权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述有机溶剂选自甲醇。

4.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述有机溶剂的体积比为100％。

5.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述红霉素菌渣含水率为2％～95％；和/或，所述菌渣与提取剂的用量比例为0.5～2.0g:10～50mL；和/或，所述供试品溶液通过如下方式得到：将菌渣用提取剂定容后，涡旋振荡2～10min，然后4000～8000rpm，离心5～10min，取上清液。

6.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱条件还包括：色谱柱为Waters-C18柱；流动相以甲醇为弱极性相，0.1％(v/v)甲酸水溶液为强极性相。

7.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱条件还包括：洗脱过程为梯度洗脱，洗脱程序包括初始阶段、中间阶段和末尾阶段，所述初始阶段的时长为1～3min，初始阶段弱极性相的体积比为5％～10％；所述中间阶段的时长为5～15min，中间阶段弱极性相的体积比为40％～95％；所述末尾阶段的时长为2～10min，末尾阶段弱极性相的体积比为5％～10％；和/或，流速为0.2～0.4mL/min；和/或，柱温为25～40℃；和/或，进样量为2～20μL。

8.按照权利要求7所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱条件还包括：流速为0.25mL/min；和/或，柱温为35℃；和/或，进样量为10μL；和/或，所述洗脱程序为：

初始阶段：0～1.5min，弱极性相的体积比为10％；

中间阶段：4min，弱极性相的体积比为40％；7～9min，弱极性相的体积比为60％；

末尾阶段：10～11min，弱极性相的体积比为10％。

9.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述质谱条件为：电离方式为电喷雾正离子模式；和/或，离子源温度为150～200℃；和/或，去溶剂气温度为400～600℃；和/或，去溶剂气流量为400～800mL/min；和/或，喷雾电压为2.8～3.5kv；和/或，锥孔电压为28～40V；和/或，碰撞电压25～35V；和/或，扫描模式为多反应监测模式，扫描母离子m/z为734.35，子离子m/z为158.07。

10.按照权利要求9所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述质谱条件为：电离方式为电喷雾正离子模式；和/或，离子源温度为150℃；和/或，去溶剂气温度为450℃；和/或，去溶剂气流量为650mL/min；和/或，喷雾电压为3.2kv；和/或，锥孔电压为34V；和/或，碰撞电压30V；和/或，扫描模式为多反应监测模式，扫描母离子m/z为734.35，子离子m/z为158.07。