[发明专利]青杨雄株的组培培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种用于青杨雄株的组培培养基及其应用，以及一种青杨雄株再生体系建立的方法。其中，用于青杨雄株的组培培养基，包括用于诱导外植体形成愈伤组织的愈伤组织诱导培养基、用于诱导愈伤组织生长不定芽的愈伤组织分化培养基和用于诱导不定芽生根的生根培养基。采用本发明提供的用于青杨雄株的组培培养基能够快速高效地获得青杨雄株和离体再生苗。

技术领域

本发明涉及植物培养领域，尤其涉及一种青杨雄株的组培培养基及其应用。

背景技术

杨树即杨柳科(Salicaceae)杨属(Populus)植物的统称，由于适应性强、分布广泛、再生能力强、树干直、成材快、基因组相对较小等特点，杨树在全球范围内都有大量种植，且在毛果杨基因组首次测序完成后，一直被作为林木分子研究的模式植株。杨属在分类系统上又进一步被分为青杨组(Tacamahaca)、白杨组(Leuce)、黑杨组(Aigeiros)、胡杨组(Turanga)、大叶杨组(Leucoides)五个组。青杨(Populus cathayana)为青杨组成员之一，性喜湿润或干燥寒冷的气候，木材纹理直，结构细，易加工，在我国各地常作人工林和行道树种植。

植物组织培养技术是在19世纪基于Schwann的细胞全能性假说提出来的一种植物组织离体培养并获得完整植株的生物技术。完整的植物组织培养过程一般包括五个步骤：对外植体进行脱毒处理；诱导外植体脱分化获得愈伤组织；诱导愈伤组织再分化得到不定芽；诱导不定芽生根；炼苗移栽。如今组织培养技术已经成为许多常规繁育困难的植物快速繁育的重要技术手段之一，由于受到环境因素影响低、繁殖迅速且大量、可保存亲本优良性状，在遗传育种上具有重要的应用价值。此外，随着转基因技术的快速发展，使用组织培养技术为手段得到大量的稳定遗传的转基因植物也是如今对许多正常生长周期较长的植物进行转基因的重要手段。

杨树组织培养起源较早，在植物组织培养技术发展前期便不断有学者以各种杨树，如欧洲黑杨、美洲山杨等为外植体材料进行离体再生培养，但是直到20世纪70年代，第一个完整的杨树再生植株的获得，才让杨树组织培养技术迅速发展起来。迄今为止，国内外学者在各大派系杨树的再生体系研究中都有重大突破，有白杨组的毛白杨、84K杨、新疆杨、山新杨，黑杨组的欧洲黑杨、美洲黑杨、南林895、欧美杨，胡杨组的胡杨，具有成熟的再生体系的杨树植株多为单性无性系植株，而对青杨雄株的快速有效地建立再生体系报道较少。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种用于青杨雄株的组培培养基。

本发明的目的之二在于提供上述用于青杨雄株的组培培养基在建立青杨雄株再生体系中的应用。

本发明的目的之三在于一种青杨雄株再生体系建立的方法。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：一种用于青杨雄株的组培培养基，包括用于诱导外植体形成愈伤组织的愈伤组织诱导培养基、用于诱导愈伤组织生长不定芽的愈伤组织分化培养基和用于诱导不定芽生根的生根培养基；

所述愈伤组织诱导培养基包括WPM 2.7g/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、TDZ 0.1mg/L～0.3mg/L、IBA 0.3mg/L～0.5mg/L，或者所述愈伤组织诱导培养基包括WPM 2.7g/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、TDZ 0.1mg/L～0.3mg/L、NAA 0.3mg/L～0.5mg/L，或者所述愈伤组织诱导培养基包括WPM 2.7g/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、6-BA 1.0mg/L、2,4-D 0.5mg/L～1.0mg/L，或者所述愈伤组织诱导培养基包括WPM 2.7g/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、ZT 2.0mg/L、NAA1.0mg/L，或者所述愈伤组织诱导培养基包括WPM 2.7g/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、6-BA0.5mg/L～1.5mg/L、NAA 0.8mg/L～1.5mg/L；