[发明专利]家族性高胆固醇血症相关基因及其检测试剂盒与应用

说明书

本发明公开了“一种家族性高胆固醇血症相关基因及其检测试剂盒与应用”，属于诊断试剂开发技术，其特征在于,包含人类LDLR基因c.817+1GC杂合突变,所述c.817+1GC杂合突变位于SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第16个碱基位置处；该位点可以作为临床辅助诊断家族性高胆固醇血症的生物标志物；通过检测受试者是否携带上述变异，可以检测该变异的携带者，为受试者提供优生优育指导和遗传咨询，减少患儿出生；为人类攻克家族性高胆固醇血症提供可能的药物治疗靶点，促进创新药物研发。

技术领域

本发明涉及诊断试剂开发，具体涉及家族性高胆固醇血症相关基因及其检测试剂盒与应用。

背景技术

家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia，FH)又称家族性高β脂蛋白血症，其临床特点是高胆固醇血症、特征性黄色瘤、早发心血管疾病家族史。FH是儿童期最常见的遗传性高脂血症，也是脂质代谢疾病中最严重的一种，可导致各种危及生命的心血管疾病并发症出现，是冠状动脉疾病的一种重要危险因素。本病最特征的临床表现为血LDL-C水平增高、黄色瘤、角膜弓和早发性冠心病。纯合子的临床表现比杂合子严重得多。FH患者的临床表现取决于其基因型，非遗传因素也对其有影响。FH基因型与表现型的关系比较复杂，即使带有相同突变，甚至属于同一家族的个体其临床表现差异也较大。

对FH患者的B型超声检查常可发现主动脉根部硬化，主动脉根部硬化逐渐加重，同时可出现主动脉瓣钙化和(或)左冠状动脉主干狭窄。15％患者有冠状动脉瘤样扩张(指冠状动脉的局限或弥漫性扩张，其直径超过了相邻正常冠脉的1.5～2倍)，而年龄、性别配对的对照组(非FH冠心病患者)中仅2.5％有冠状动脉瘤样扩张。并同时发现冠状动脉瘤样扩张与血浆HDL-C水平呈负相关，因而认为FH者易发生冠状动脉瘤样性疾病。FH患者血脂代谢失衡，会加快动脉粥样硬化及早发冠心病的进程，因而早期发现和诊断FH,及早进行干预，可显著降低冠脉疾病的发病率及死亡率，改善临床预后。

目前，基因检测是确诊FH的一种新型手段。任何一个或一组FH的相关基因的发现与提出都将是对本领域的重要技术贡献。目前已知的FH相关变异超过2000个，其中约1000个变异已经得到足够证据支持而被归类为致病变异和可能致病变异两类之中，这些变异主要分布在三个基因:LDLR(90％以上)、APOB(5％～10％)、PCSK9(1％以下)。但是仍有部分FH患者无法用已知的致病基因解释，提示存在未发现的致病基因，有必要进一步探索完善FH致病基因数据从而提高早期检测FH的准确率。

发明内容

基于上述领域的需求和发明人的发现，本发明提供家族性高胆固醇血症相关基因的应用及其检测试剂盒，技术方案如下：

1.一种LDLR突变基因，其特征在于,包含人类LDLR基因c.817+1GC杂合突变,所述c.817+1GC杂合突变位于SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第16个碱基位置处。

2.检测所述LDLR突变基因的试剂在制备家族性高胆固醇血症检测试剂盒中的用途。

3.根据所述的用途，其特征在于，所述试剂包含PCR扩增所需试剂。

4.根据所述的用途，其特征在于，所述试剂包含SEQ ID NO:2所示的正向引物，SEQID NO:3所示的反向引物。

5.根据所述的用途，其特征在于，所述试剂包含Sanger测序试剂、荧光定量PCR试剂、限制性酶切片段长度多态性方法用试剂、单链构象多态性分析用试剂和等位基因特异的寡聚核苷酸杂交用试剂中的一种或多种。

6.一种家族性高胆固醇血症相关基因的检测试剂盒，其特征在于，包含检测前述LDLR突变基因的试剂。

7.根据所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂包含PCR扩增所需试剂。