[发明专利]一种筛查胃癌相关基因突变的方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测胃癌基因突变位点的方法，其特征在于，所述方法包括：

1)捕获：进行第一轮特异性多重PCR反应，使用61对引物对样品DNA进行扩增，所述61对PCR引物于T1试管进行反应，试管引物为61对SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.61；

2)建库：进行第二轮接头PCR反应，使用接头序列为IGT-I5 Index和IGT-I7Index，对步骤1)获得的扩增产物进行扩增，得到多重PCR文库；

3)定量和质量检测：对步骤2)获得的多重PCR文库进行文库浓度测定，并对文库片段长度和纯度进行检测；

4)测序：对步骤2)获得的多重PCR文库进行测序；

5)分析：对步骤4)获得的测序结果进行分析，完成全编码区的突变检测。

2.一种胃癌基因突变多重PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括：两套PCR引物；所述的两套PCR引物，第一套PCR引物包括61对PCR引物，第二套PCR引物为通用引物，包括IGT-I5Index和IGT-I7Index。

3.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重PCR检测试剂盒，所述试剂盒还包括IGT-EM808聚合酶混合物、扩增缓冲增强剂NB、YF磁珠漂洗缓冲液B和试剂M。

4.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有水。

5.根据权利要求3所述的一种胃癌基因突变多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中，第一套引物的PCR反应的反应体系按如下比例配制：IGT-EM808聚合酶混合物10份、第一套PCR引物5份、扩增缓冲增强剂NB 3.5份、试剂M 2.5份、gDNA(ng/μl)+ddH₂O 9份。

6.根据权利要求2所述的一种胃癌基因突变多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中，第二套PCR反应的反应体系按如下比例配制：第一轮多重PCR产物13.5份、IGT-EM808聚合酶混合物10份、接头序列IGT-I5 Index1份(10μM)、接头序列IGT-17Index 1份(10μM)、试剂M 2.5份、ddH₂O2份。