[发明专利]一种稻曲病菌薄壁分生孢子的转移和分散方法

权利要求书

1.一种稻曲病菌（ Ustilaginoidea virens）薄壁分生孢子的转移和分散方法，其特征是，直接从产孢菌落上拾取孢子并转移分散到观测平板上，孢子转移和分散的操作步骤如下：

1)材料及器具的准备：用常规方法制备马铃薯琼脂培养基作孢子萌发观测培养基备用；用培养皿作保湿容器，常规消毒后备用；用棉签作孢子转移器具，先在棉签上用记号笔点画标记，再装入枪头盒，进行常规高温高压灭菌后备用；

2)孢子源的准备：采用马铃薯琼脂培养基作为稻曲病菌薄壁分生孢子的产孢培养基，进行稻曲病菌的产孢培养，直至形成产孢菌落，以该产孢菌落作为孢子源菌落；

3)孢子观测板的制备：取步骤1)制备的马铃薯琼脂培养基加热熔化，倒入灭菌培养皿制成普通平板，平板冷凝后用灭菌刀片将该平板切成条状平板，并将条状平板转移到灭菌载玻片上，作为分生孢子的观测板；

4)孢子的拾取与密集孢子的稀释：将步骤1)准备的灭菌棉签的端部球面，在步骤2)准备的孢子源菌落上碰触，吸附拾取孢子；然后转移到空白琼脂平板上抹涂与点印，稀释棉签上的密集孢子；在进入下一步骤操作前，将已经拾取孢子的棉签置于步骤1)准备的保湿容器内，以保护棉签吸附孢子的活性；

5)孢子的转移与释放：取步骤4)稀释孢子后的棉签，在步骤3)制备的孢子观测板面不同位置作有序连续点印，得到孢子数量相近、且孢子分散性良好的孢子印迹；

6)孢子的培养观测：将步骤5)得到载有孢子印迹的观测板置于具有保湿效果的保鲜盒内，置于工作设定的培养条件下培养，按工作要求观察与测定这些分生孢子的萌发与生长特征。