[发明专利]一种烟草提取物残渣的二次提取方法

说明书

本发明公开了一种烟草提取物残渣的二次提取方法，包括：将保藏编号为CGMCC NO.21313的微球菌ZY02的菌落接种至液体培养基中，制得种子液；将微球菌种子和残渣混溶物混合发酵，得到发酵残渣混溶物；过滤发酵残渣混溶物，得到第一滤液和第一固形物，对第一滤液离心，得到第二固形物；将第一固形物和第二固形物混合得到的第三固形物和无水乙醇震荡后过滤得到第二滤液；将上清液和第二滤液混合，得到的烟草二次提取液真空浓缩，得到浓缩液；对浓缩液进行回流提取处理，得到烘烤浓缩液；在烘烤浓缩液中加入无水乙醇，离心得到醇沉物；在醇沉物中加入1,2‑丙二醇。本公开的烟草提取物残渣的二次提取方法可有效提取烟草提取物残渣中的有益成分，得到新型烟草提取物。

技术领域

本发明涉及烟草废料利用领域，更具体地，涉及一种烟草提取物残渣的二次提取方法。

背景技术

烟草提取物是卷烟加工中极为重要的烟用香料，可赋予卷烟更为自然、饱满的香气。

烟草提取物的制备一般先把烟叶或碎片粉碎成烟末，使用有机物或水作为溶剂，以将烟末中的香味成分进行提取、纯化、浓缩。提取过程中，易溶于溶剂的成分被提取出，而一些固形物如纤维、蛋白、淀粉、果胶、木质素，以及一部分内部包裹的香味成分等难以被提取，形成烟末残渣。

这些烟末残渣一般被丢弃，造成浪费。而某些优质的烟草资源价格较高，用于制备烟草提取物后剩余的残渣如果可以二次提取，制备出新的烟草提取物，将会产生更好的经济和社会效益。

对烟草提取物残渣进行二次提取，首先要把大分子物质降解，一方面是将大分子物质转化为小分子和香味成分，另一方面是把烟草中包裹的香味成分更好地释放。残渣中的大分子物质可以通过化学法和生物法进行降解。化学法主要包括强酸或强碱法，此种方法很难解决残留的酸、碱，不适宜用于烟草提取物的制备。生物法主要通过微生物或酶制剂处理，以将大分子物质降解转化为可溶性糖和氨基酸等小分子，进而可以在高温条件下诱导美拉德反应，产生更多的香味成分。某些增香微生物本身也可以利用糖和氨基酸产生香味物质，利用生物法处理烟草提取物残渣并进行二次提取，具有较好的实用价值。

因此，如何提供一种可有效提取烟草提取物残渣中的有益成分的生物法处理烟草提取物残渣的方法成为本领域亟需解决的技术难题。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种可有效提取烟草提取物残渣中的有益成分的生物法处理烟草提取物残渣的方法的新技术方案。

根据本发明的第一方面，提供了一种烟草提取物残渣的二次提取方法。

该烟草提取物残渣的二次提取方法包括如下步骤：

步骤(1)：将保藏编号为CGMCC NO.21313的微球菌(Micrococcaceae Pribram)ZY02的菌落接种至液体培养基中，于25-40℃，100-200r/min的摇床中培养6-36h，制得种子液；

步骤(2)：将种子液在4000r/min，4℃的条件下低温离心20min，去除上清液，加入无菌水复溶，调节OD₆₀₀为2.0，制得微球菌种子；

步骤(3)：将烟草提取物残渣与去离子水按照质量比1:(1-10)混合，得到残渣混溶物；

步骤(4)：将微球菌种子和残渣混溶物按照体积质量比1:(10-200)混合，恒温搅拌发酵12-96h，得到发酵残渣混溶物，其中，微球菌种子的体积的单位为mL，残渣混溶物的质量的单位为g；

步骤(5)：过滤发酵残渣混溶物，得到第一滤液和第一固形物，对第一滤液离心进行离心处理，得到上清液和第二固形物；

步骤(6)：将第一固形物和第二固形物混合得到第三固形物，将第三固形物和无水乙醇按照质量体积比1:(1-20)混合，常温震荡一段时间后，过滤得到第二滤液，其中，第三固形物的质量的单位为g，无水乙醇的体积的单位为mL；