[发明专利]siRNA递送载体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种siRNA递送载体，其特征在于包括纳米囊泡以及负载于所述纳米囊泡内的siRNA，所述纳米囊泡由红细胞膜制得。

2.根据权利要求1所述的siRNA递送载体，其特征在于：所述siRNA包括PDL1 siRNA；优选的，所述siRNA的包封率为70％～90％，siRNA的载药率为1wt％～3wt％；

和/或，所述纳米囊泡的粒径为100～400nm；

和/或，所述纳米囊泡表面保留有红细胞膜功能分子；优选的，所述红细胞膜功能分子包括功能膜蛋白CD47。

3.如权利要求1或2所述的siRNA递送载体的制备方法，其特征在于包括：

将红细胞膜制备成纳米囊泡；

将siRNA与阳离子脂质体进行孵育，制得siRNA/阳离子脂质体复合物；

以及，将所述siRNA/阳离子脂质体复合物负载于纳米囊泡内，获得siRNA递送载体。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于包括：将siRNA与阳离子脂质体共同孵育20～30min，制得所述siRNA/阳离子脂质体复合物；

和/或，将所述siRNA/阳离子脂质体复合物与纳米囊泡超声处理1.0～15min，获得所述siRNA递送载体；

和/或，所述siRNA、阳离子脂质体与纳米囊泡的质量比为1∶(3～5)∶(30～160)。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述红细胞膜是采用低渗处理法处理红细胞形成的；优选的，所述红细胞膜的制备方法具体包括：将红细胞置于PBS溶液中震荡孵育1～3h，之后于12000～14000rpm离心10～20min，获得所述红细胞膜；

和/或，所述纳米囊泡是采用薄膜水化法和挤压过膜的方式处理所述红细胞膜形成的；优选的，所述纳米囊泡的制备方法具体包括：将红细胞膜进行冷冻干燥，采用薄膜水化法和超声处理，再挤压过膜10～30次，获得所述纳米囊泡；更为优选的，所述薄膜水化法具体包括：将冷冻干燥所获红细胞膜分散于水中，再与乙醇、氯仿混合；更为优选的，所述超声处理采用的功率为20～60W，频率为20～25KHz，超声时间为1～5min；更为优选的，所述挤压过膜采用脂质体挤出装置，采用的滤膜是孔径为100～400nm的聚碳酸酯膜。

6.一种基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体，其特征在于包括纳米囊泡，负载于所述纳米囊泡内的siRNA，以及负载于所述纳米囊泡表面的胆固醇修饰的核酸适配体，所述纳米囊泡由红细胞膜制得。

7.根据权利要求6所述的基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体，其特征在于：所述siRNA包括PDL1 siRNA；优选的，所述siRNA的包封率为70％～90％，siRNA的载药率为1wt％～3wt％；

和/或，所述纳米囊泡的粒径为100～400nm；

和/或，所述纳米囊泡表面保留有红细胞膜功能分子；优选的，所述红细胞膜功能分子包括功能膜蛋白CD47；

和/或，所述核酸适配体具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

8.如权利要求6或7所述的基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体的制备方法，其特征在于包括：

采用权利要求3-5中任一项所述方法制备siRNA递送载体；

以及，将胆固醇修饰的核酸适配体与所述siRNA递送载体进行孵育，获得基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于包括：

将胆固醇修饰的核酸适配体与所述siRNA递送载体共同孵育0.5～1.0h，获得基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体。

10.权利要求1或2所述的siRNA递送载体或权利要求6或7所述的基于核酸适配体靶向的siRNA递送载体在制备抗肿瘤药物领域中的应用。