[发明专利]一种蛋白质提取试剂及其制备方法以及蛋白质提取方法

说明书

本发明公开了一种蛋白质提取试剂及其制备方法以及蛋白质提取方法，蛋白质提取试剂包含质量体积比为40g/L的尿素、质量体积比为1g/L的十二烷基硫酸钠、体积百分含量为0.1％的聚乙二醇辛基苯基醚、质量体积比为8g/L的氯化钠、质量体积比为0.2g/L的氯化钾、质量体积比为1.42g/L的磷酸氢二钠、质量体积比为0.27g/L的磷酸二氢钾、质量体积比为8g/L的乙二胺四乙酸、体积百分含量为1％的二甲基亚砜；制备方法包含将乙二胺四乙酸粉末溶解于800mL去离子水后加40g尿素溶解，加十二烷基硫酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、二甲基亚砜溶解定容至1升制得蛋白质提取试剂。

技术领域

本发明涉及蛋白质提取试剂领域，具体涉及一种蛋白质提取试剂及其制备方法以及蛋白质提取方法。

背景技术

蛋白质组学研究能够通过构建细胞中蛋白质表达的时间及空间差异图谱揭示生命规律，蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离技术是蛋白质组学研究的关键技术，而对蛋白组学差异分析的关键技术是总蛋白是否完全提取，在总蛋白的提取上，细胞裂解液是广泛使用在蛋白分析和检测上的一种试剂，因裂解细胞或组织的强度而被分为强、中、弱三种，分别用于不同的使用中，然而这三种细胞组织裂解液均不能够完全提取出细胞或组织中的全蛋白，因为其条件的限制，往往会出现细胞沉淀或大量不溶于裂解液中的脂蛋白等；

近年来，蛋白提取越来越专业化，如细胞核蛋白提取、细胞膜蛋白提取、细胞浆蛋白提取和线粒体蛋白提取等，分别用于不同的科研领域，但是这些技术仍然存在不能够完全提取出总蛋白的缺点；

RIPA提取总蛋白的方法以价格低廉、操作简单及重复性较好等特点被广泛应用在蛋白质组学研究中，广泛采用的试剂有十二烷基磺酸钠、二甲基亚砜、曲拉通等，能够起到裂解细胞促进蛋白质溶解，防止细胞裂解液中蛋白质降解等作用，大大提高了细胞或组织中全蛋白的提取，但是，在蛋白提取前处理步骤较为繁琐，大大增加了操作时间，增加了组织或细胞被污染的概率。

发明内容

本发明要解决的技术问题是现有的在蛋白提取前处理步骤较为繁琐，大大增加了操作时间，增加了组织或细胞被污染的概率，本发明提供一种蛋白质提取试剂，本发明还提供一种蛋白质提取试剂的制备方法，本发明还提供一种蛋白质提取方法，能够不需要提取前对细胞或组织进行前处理，能够缩短提取组织或细胞中全蛋白的时间，极大的减少了蛋白质样本被污染的可能，能够大大的提高细胞和组织中总蛋白的提取效率，且成本较为低廉；依据一种蛋白提取试剂的使用方法进行蛋白质的提取能够在极短的时间内完成蛋白的提取，并在短时间内的到细胞或组织中的全蛋白，添加的尿素、聚乙二醇辛基苯基醚能够有效的裂解细胞和组织促进蛋白质溶解，添加的乙二胺四乙酸和二甲基亚砜，有助于抑制蛋白质降解，能够而不降低蛋白活性并提取到组织或细胞中表达量较低的蛋白，用以解决现有技术导致的缺陷。

为解决上述技术问题本发明提供以下的技术方案：

第一方面，一种蛋白质提取试剂，其中，包含尿素、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、乙二胺四乙酸、二甲基亚砜。

上述的一种蛋白质提取试剂，其中，所述尿素的质量体积比为40g/L；

所述十二烷基硫酸钠的质量体积比为1g/L；

所述聚乙二醇辛基苯基醚的体积百分含量为0.1％；

所述氯化钠的质量体积比为8g/L；

所述氯化钾的质量体积比为0.2g/L；

所述磷酸氢二钠的质量体积比为1.42g/L；

所述磷酸二氢钾的质量体积比为0.27g/L；

所述乙二胺四乙酸的质量体积比为8g/L；

所述二甲基亚砜的体积百分含量为1％。