[发明专利]用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的分子标记Oil-11-6708663、试剂盒和方法有效
| 申请号： | 202110678257.2 | 申请日： | 2021-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN113355443B | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 孙君明;张晟瑞;李斌;艾哈迈德·马布鲁克·阿卜杜勒法德尔·阿卜杜勒加尼;刘艺田;李静 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 向群 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 辅助 鉴别 大豆 油脂 含量 高低 分子 标记 oil 11 6708663 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的分子标记Oil-11-6708663，其特征在于，所述分子标记Oil-11-6708663的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的试剂盒，其特征在于，包括分子标记Oil-11-6708663；所述分子标记Oil-11-6708663的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括分子标记Oil-11-6708663的特异性引物。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性引物的序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 4所示。
5.根据权利要求2-4任一所述的试剂盒，其特征在于，还包括：用于PCR的试剂。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述用于PCR的试剂包括：dNTPs、Taq酶、PCR缓冲液、ddH2O。
7.一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的方法，其特征在于，采用分子标记Oil-11-6708663的特异性引物进行辅助鉴别；所述分子标记Oil-11-6708663的核苷酸序列如SEQID NO.1所示；采用所述分子标记Oil-11-6708663的特异性引物对待测大豆材料的DNA进行竞争性等位基因特异性PCR扩增，利用Kluster Caller基因分型仪检测PCR产物的荧光信号，对Oil-11-6708663标记进行分型；检测结果为AA的大豆材料为候选高油型大豆；检测结果为GG的大豆材料为候选低油型大豆。
8.根据权利要求7所述的一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的方法，其特征在于，所述分子标记Oil-11-6708663的特异性引物序列分别如SEQ ID NO. 2、SEQ ID NO. 3和SEQID NO. 4所示。
9.根据权利要求7所述的一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的方法，其特征在于，所述待测大豆材料的DNA可提取自大豆叶片、种子、根、茎、花、果实。
10.根据权利要求7所述的一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的方法，其特征在于，所述PCR反应体系为2.5 μL基因组DNA，如SEQ ID NO. 2、SEQ ID NO. 3的正向引物1和2各0.00672 μL，如SEQ ID NO. 4所示的反向引物0.0168 μL，2.5 μL 2×KASP Master mix缓冲液，0.231 μL ddH2O。
11.根据权利要求7或10所述的一种用于辅助鉴别大豆油脂含量高低的方法，其特征在于，PCR反应程序为：95℃，15 min；以94℃、20s，65-57℃、60s，每个循环下降0.8度，共10个循环；以94℃、20s，57℃、60s，共33个循环。
12.一种大豆分子辅助育种方法，其特征在于，采用权利要求7-11任一所述的方法在大豆生长周期的任意阶段筛选出候选高油型大豆或候选低油型大豆用于大豆育种。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院作物科学研究所，未经中国农业科学院作物科学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110678257.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
