[发明专利]一种新冠病毒疫苗的表达载体及其构建方法、应用和疫苗在审
申请号: | 202110673867.3 | 申请日: | 2021-06-17 |
公开(公告)号: | CN113186223A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 苏小平;李锐;李伟迎;张齐 | 申请(专利权)人: | 浙江格源致臻生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/50;C12N15/66;C07K14/165;A61K39/215;A61P31/14 |
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地址: | 325000 浙江省温州市高新技术产业开发区创*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病毒 疫苗 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种新冠病毒疫苗的表达载体,其特征在于,所述表达载体能够同时表达新冠病毒的S蛋白和NP蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种新冠病毒疫苗的表达载体,其特征在于,所述表达载体所表达的蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。
3.一种如权利要求1~2中任一项所述新冠病毒疫苗的表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
将表达新冠病毒S蛋白与NP蛋白的核苷酸序列使用2A肽进行连接,合成融合基因;
在融合基因的两端分别包含两个酶切位点,并装载到质粒,得到重组质粒;
对重组质粒进行双酶切,切胶回收目的基因片段;
对原始的质粒进行双酶切,切胶回收载体片段;
将目的基因片段和载体片段进行连接,得到所述表达载体。
4.根据权利要求3所述的一种新冠病毒疫苗的表达载体的构建方法,其特征在于,2A肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。
5.根据权利要求3所述的一种新冠病毒疫苗的表达载体的构建方法,其特征在于,两个酶切位点分别为XbaI和SalI酶切位点。
6.根据权利要求3所述的一种新冠病毒疫苗的表达载体的构建方法,其特征在于,两个酶切位点分别为NheI和HindIII酶切位点。
7.根据权利要求3所述的一种新冠病毒疫苗的表达载体的构建方法,其特征在于,步骤中,使用DNA连接酶将目的基因片段和载体片段进行连接。
8.一种采用如权利要求3~7中任一项所述构建方法得到的表达载体。
9.一种如权利要求1~2、8中任一项所述表达载体在制备治疗和/或预防新冠病毒的药物中的应用。
10.一种疫苗,其特征在于,所述疫苗由如权利要求1~2、8中任一项所述表达载体制得。
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