[发明专利]一种过表达miR-13474工程化外泌体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种人脐带间充质干细胞源外泌体来源的miR-13474，其特征在于，所述miR-13474的前体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其成熟编码序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的人脐带间充质干细胞源外泌体来源的miR-13474、或包含所述miR-13474的组合物在制备用于糖尿病足创面修复药物中的用途。

3.一种用于糖尿病足创面修复的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中含有如权利要求1所述的人脐带间充质干细胞源外泌体来源的miR-13474以及药学上可接受的载体或佐剂。

4.一种用于糖尿病足创面修复的伤口护理产品，其特征在于，所述产品中含有如权利要求1所述的人脐带间充质干细胞源外泌体来源的miR-13474。

5.一种工程化外泌体，其特征在于，所述的工程化外泌体中miR-13474 过表达分泌；所述miR-13474的前体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其成熟编码序列如SEQ ID NO.2所示。

6.根据权利要求5所述的工程化外泌体，其特征在于，所述工程化外泌体为人脐带间充质干细胞源外泌体。

7.一种工程化外泌体的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：

将如权利要求1所述的miR-13474和HucMSC-Ex充分混匀后加入到电极杯中，随后将电极杯放在电穿孔仪器的电极杯槽中进行电转，miR-13474进入HucMSC-Ex内得到过表达miR-13474的工程化外泌体。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述电穿孔仪器的参数为：穿孔电压110 V，穿孔电压持续时间3 ms，穿孔后静息时间10 ms，驱动电压25 V，驱动电压持续时间50 ms，驱动后静息时间50 ms，驱动循环次数10。