[发明专利]一种氧化石墨烯基复合纳米给药系统及其制备方法

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种用于宫颈癌治疗的氧化石墨烯基复合纳米给药系统及其制备方法，该复合纳米给药系统是由核酸适配体NH₂‑AS1411（Aptamer NH₂‑AS1411，APT）、单层氧化石墨烯（GO）、壳寡糖（CO）和γ‑聚谷氨酸（γ‑PGA）组成，靶向纳米系统协同化学疗法和近红外光热疗法，显著提高癌细胞杀伤效率，主动地积聚在肿瘤部位，刺激药物释放，进一步破坏肿瘤组织。更为重要的是其对生物体的正常组织器官没有明显的毒副作用，最大程度地减少对非肿瘤部位的损害，在生物体内可以安全高效的发挥肿瘤治疗作用。为构建用于临床癌症治疗的靶向纳米载药体系提供了一种有价值的参考方法。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种用于宫颈癌治疗的氧化石墨烯基复合纳米给药系统及其制备方法。

背景技术

光热疗法（PTT）是利用某些生物材料具有在近红外区域吸收光热转换为热能的特性，在杀伤肿瘤细胞的同时对人体无毒副作用的一种局部治疗肿瘤的新手段，被国际医学界称为“绿色疗法”。近年来，利用GO在近红外808 nm处吸收光能转换为热能的特性及联合化学药物治疗癌症的方法得到了广泛的关注。利用GO或者其衍生物对抗肿瘤药物负载进入到肿瘤部位后，进行808 nm近红外激光照射产热使得肿瘤部位升温，改变毛细血管的通透性，提高药物在血液中的浓度，产生的热能对化疗有增敏作用从而提高化疗药物在肿瘤细胞内的浓度，同时降低了药物对周围正常细胞或者组织的毒副作用，达到热疗和化疗双重抗肿瘤的功效。

纳米技术发展至今，获得FDA批准的可用于临床癌症治疗的纳米药物屈指可数，主要包括阿霉素脂质体和伊利替康脂质体等，如今，越来越多的纳米载药复合体系已在实验室中得到开发和研究，不过其距离临床试验尚且遥远；动物体内实验在此过程中显得尤为重要，它可以为临床试验提供不可或缺的研究基础。

发明内容

本发明的目的是针对上述存在的问题，提供了一种氧化石墨烯基复合纳米给药系统，本发明总体思路为首先对构建的复合纳米给药系统通过光热效应与光热稳定性、体外光热疗效进行研究，然后确定给药系统的安全性，最后进行裸鼠体内抗肿瘤效果研究。

本发明还提供了一种氧化石墨烯基复合纳米给药系统的制备方法。

本发明为了实现上述目的采用的技术方案如下：

本发明提供了一种氧化石墨烯基复合纳米给药系统，所述复合纳米给药系统，制备原料包括：核酸适配体NH2-AS1411、单层氧化石墨烯（GO）、壳寡糖（CO）、γ-聚谷氨酸（γ-PGA）、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐（EDC）、N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）、2-吗啉乙磺酸缓冲液（MES buffer）、磷酸盐缓冲液（PBS buffer）。

本发明还提供了一种上述氧化石墨烯基复合纳米给药系统的制备方法，包括以下步骤：

（1）取单层GO溶于超纯水中，超声粉碎，将超声后的溶液离心， 除去未剥离的GO，即获得GO悬浮液；

（2）取GO悬浮液，利用MES缓冲液将溶液pH调至5-6，依次加入EDC和NHS，超声后封口，置于摇床，反应后离心，除去上清；

（3）将CO溶于PBS缓冲液中，超声，充分溶解得CO溶液，利用CO溶液重悬GO沉淀，利用PBS缓冲液将混合液pH调至7.2-7.5，超声后封口，置于摇床反应，反应后将反应液离心洗涤，透析得GO-CO；

（4）取γ-PGA溶于超纯水中，得γ-PGA水溶液，利用MES缓冲液将溶液pH调至5-6，加入EDC和NHS，超声后封口，置于摇床反应，得γ-PGA溶液；

（5）取GO-CO溶于超纯水中，超声后得GO-CO溶液，将活化好的γ-PGA溶液加入到GO-CO溶液中，利用PBS缓冲液将混合液pH调至7.2-7.5，超声后封口，置于摇床反应，反应后将反应液离心洗涤，透析，冷冻干燥得到GO-CO-γ-PGA粉末；