[发明专利]一种VAV2基因缺失的肿瘤细胞系有效
申请号: | 202110668444.2 | 申请日: | 2021-06-16 |
公开(公告)号: | CN113322237B | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 林东昕;吴晨;苗传望;刘伟玲;席奕轶;刘亚宸;林皑;仲策;张少森 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院肿瘤医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/85;A01K67/027;C12Q1/02;C12R1/91 |
代理公司: | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人: | 朱萍;孟祥斌 |
地址: | 100021 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 vav2 基因 缺失 肿瘤 细胞系 | ||
1.一种食管癌细胞系,所述食管癌细胞系命名为VAV2基因缺失小鼠食管癌细胞系NCCE2,于2021年3月3日由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:C202140。
2.一种构建VAV2基因缺失的食管癌细胞系的方法,所述方法包括如下步骤:
1)利用Cas9/RNA system gene targeting技术,针对mouse VAV2基因设计gRNA,构建包含所述gRNA的载体;
2)使用1)中构建的载体敲除小鼠的VAV2基因,获得VAV2基因中缺失如SEQ ID NO:1所示序列的小鼠;
3)诱导2)获得的小鼠成瘤;
4)取3)的肿瘤组织,继续培养,获得食管癌细胞系。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述小鼠是C57BL/6小鼠。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述诱导包括使用致癌剂对小鼠进行处理。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述处理是饲喂致癌剂。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述致癌剂是4NQO。
7.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述肿瘤组织是食管处的新生肿瘤。
8.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述食管癌细胞系是经过实验验证的细胞系。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述实验验证包括增殖能力检测、克隆能力检测、细胞迁移能力检测。
10.权利要求2所述的VAV2基因中缺失如SEQ ID NO:1所示序列的小鼠在制备VAV2缺失的细胞系中的应用。
11.权利要求1所述的细胞系的用途,其特征在于,所述用途包括以下任意一种:筛选和/或评价/制备肿瘤治疗药物,开发肿瘤药物靶点,制备肿瘤诊断试剂,开发肿瘤治疗新技术,开发检测肿瘤相关生物工程产品。
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