[发明专利]一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法

说明书

本发明提供一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法，属于中药材分析检测领域，包括以下步骤：S1、以甲醇溶液为溶剂浸提三七代谢产物，得到供试品；S2、采用UHPLC LTQ Oribitrap MS联用技术对三七代谢产物提取液进行非靶向成分测定，得到原始数据；S3、对原始数据依次进行预处理和多元统计学分析；S4、以变量重要性投影指标为筛选指标筛选差异性代谢物；本发明基于三七整体性分析，以UHPLC LTQ Oribitrap MS技术结合非靶向代谢组学，并结合主成分分析筛选不同规格三七差异性代谢物，可用于准确区分不同商品规格三七，为三七市场药材商品规格标准提供理论依据。

技术领域

本发明涉及中药材分析检测领域，具体涉及一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法。

背景技术

三七又名山漆、金不换，为五加科植物三七)Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根茎，在中药临床应用非常广泛，也是我国传统的名贵中药、金疮药。三七性味甘、微苦、温，归肝、胃经，功能与主治是散瘀止血，消肿定痛。用于咳血、吐血、衄血、便血、崩漏、外伤出血、胸腹刺痛、跌扑肿痛等。

根据部颁标准《七十六种药材商品规格标准》记载，三七规格等级可按照采收季节、药用部位、药材大小(重量)进行分级；在商品市场上，三七主根重量是区分不同级别三七的主要方式，不同大小(重量)的三七价格差异极大。

目前，对不同大小(重量)三七的内在成分的研究较少，主要包括利用苯酚-硫酸法测定其多糖含量、用GC-MS对挥发性成分进行测定等，这些研究并没有提出明确的三七内在成分作为区分商品药材的内在指标，因此，探究不同大小规格三七的差异性代谢物，寻找三七内在成分指标具有实际意义。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法，本发明拟整合超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱联用技术(UHPLC LTQOribitrap MS)和非靶向代谢组学手段对25头三七和80头以下三七的质谱数据进行挖掘，筛选其差异性代谢物，为规范三七市场药材商品规格标准提供依据。

本发明的目的采用以下技术方案来实现：

一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法，包括以下步骤：

S1、三七样品代谢产物的提取；

以甲醇溶液为溶剂浸提三七代谢产物，得到供试品；

S2、非靶向成分测定；

采用UHPLC LTQ Oribitrap MS联用技术对三七代谢产物提取液进行非靶向成分测定，得到原始数据；

S3、数据的处理与分析

对原始数据依次进行预处理和多元统计学分析；

S4、数据挖掘发现差异性代谢物；

以变量重要性投影指标为筛选指标筛选差异性代谢物。

优选的，步骤S1的提取方法是将三七粉碎并过40目筛，称取过筛后的三七粉末0.600g，加入20ml的体积分数70％的甲醇溶液，超声提取40min，分离提取液，提取液过0.22μm微孔滤膜，得到供试品。

优选的，步骤S2的测定方法具体是：