[发明专利]检测烟草黑胫病的探针基因、引物对、试剂盒及应用有效
| 申请号： | 202110659004.0 | 申请日： | 2021-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN113430290B | 公开（公告）日： | 2022-08-26 |
| 发明（设计）人： | 王文静;王晓强;王凤龙;任广伟 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院烟草研究所（中国烟草总公司青州烟草研究所） |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人： | 袁晓玲 |
| 地址： | 266000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 烟草 黑胫病 探针 基因 引物 试剂盒 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一个基因片段在制备检测烟草黑胫病菌的试剂盒中的应用，其特征在于，所述基因片段如SEQ ID NO:1所示，所述试剂盒包括PCR引物对，所述PCR引物对包含的正向引物序列如SEQ ID NO:2所示；反向引物序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，从烟草植株上刮取发病组织，提取DNA，以所提取的DNA为模板，进行PCR扩增，并将PCR产物进行凝胶电泳，若出现543bpDNA条带，则待测样本为烟草黑胫病菌。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，PCR扩增反应条件为： 94°C变性1min；94°C变性30s，58°C退火30s，72°C延伸50s，35个循环；72°C延伸10min；4°C保温。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括Taq DNA 聚合酶、PCR缓冲液、dNTPs 和ddH2O。
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