[发明专利]用于猪囊尾蚴病的上转发光颗粒检测卡，其制备方法及应用

说明书

本发明涉及生物检测技术领域，具体讲，涉及用于猪囊尾蚴病的上转发光颗粒检测卡，其制备方法及应用。上转发光颗粒检测卡包括样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；分析膜上设置有检测线和质控线；结合垫上包被有上转换发光颗粒标记的山羊抗猪IgG，检测线上包被有猪囊尾蚴活性蛋白GP50；编码猪囊尾蚴活性蛋白GP50的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明制备的检测卡具有抗原制备简单，简便快捷和结果易判读等优点，且不与其他寄生虫阳性血清发生交叉反应，特异性高、稳定性好，实用性较强、容易保存、可用于大批量检测，极具市场前景。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体讲，涉及用于猪囊尾蚴病的上转发光颗粒检测卡，其制备方法及应用。

背景技术

猪囊尾蚴病是猪带绦虫的幼虫寄生在猪或人的体内而引起的一种人兽共患寄生虫病。该病不但给养猪业造成巨大损失，而且危害人类的健康，严重的甚至导致死亡。目前世界卫生组织(WHO)已将其列为“17个被忽略的热带疾病之一”，并将其确定为重点研究和控制的疾病。联合国粮食与农业组织(FAO)和世界卫生组织公布的“十大危害人类食源性寄生虫”，囊尾蚴位列首位，同时也是我国“国家卫生部规划防治的重点寄生虫病之一”。猪带绦虫囊尾蚴病的诊断依赖于成像技术或免疫学诊断。成像技术中对于囊虫病最具诊断价值的是计算机扫描(CT)和磁共振成像(MRI)，但这两项技术的准确性与敏感性高度依赖囊肿定位与感染阶段，因此具有敏感性低、成本高和可用性低等缺点，欲适时普遍作为猪囊尾蚴病的检测，从某种角度来说缺少可行性。另外，两种检测方法无法实现对虫卵入侵到成囊阶段及人患绦虫病的检测。免疫学检测方法具有适用性好的特点被广泛应用，目前猪带绦虫/囊尾蚴病免疫学检测研究所依赖的抗原多为囊液抗原、虫体抗原、排泄/分泌抗原等，这些抗原不仅来源有限、制备繁琐，而且与多种寄生虫存在严重交叉反应。基于单一重组抗原的血清学方法，如酶联免疫吸附法(ELISA)和酶联免疫电转移印迹法(EITB)检测方法克服上述缺点，但在检测上仍然会与类似疾病(如包虫病、细颈棘球蚴病)存有交叉反应，更为重要的缺陷是需要昂贵的仪器设备、专业的操作人员、复杂的数据处理及灵敏性不理想等问题，致使两种方法多停留在研究的初级阶段，而不能满足适时检测的要求。胶体金免疫层析检测方法的出现，一定程度上解决了上述检测法中存在的问题，但其方法难以实现对样品的多重分析和定量分析，结果判断的误差多种免疫学检测法无法避免的问题。另外，现今诊断所选表达重组抗原，其抗原决定簇极易翻译后因修饰而改变或内部错综折叠，导致所具有的活性明显降低或失去活性，影响检测的效果，欲想将工厂化生产高质量和数量的重组抗原难度较大，并且所产生的费用非常的昂贵。因此，加强筛选特异性重组抗原或单克隆抗体，建立检测抗体或抗原的新型免疫学诊断方法显得尤为重要。而依赖于重组抗原/抗体研制高敏感性、高特异性和适用性强的检测产品将成为当下研究的热点，同时也是解决上述检测方法缺点的新手段。因此，而依赖于重组抗原/抗体研制高敏感性、高特异性和适用性强的检测产品将成为当下研究的热点，同时也是解决上述检测方法缺点的新手段。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提供一种检测猪囊尾蚴病的上转发光颗粒的检测卡。

本发明的第二发明目的在于提供该检测猪囊尾蚴病的上转发光颗粒的检测卡的制备方法。

本发明的第三发明目的在于提供该检测猪囊尾蚴病的上转发光颗粒的检测卡的应用。

为了完成本发明的发明目的，采用的技术方案为：

本发明涉及一种用于猪囊尾蚴病的上转发光颗粒检测卡，所述上转发光颗粒检测卡包括样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；所述分析膜上设置有检测线和质控线；所述结合垫上包被有上转换发光颗粒标记的山羊抗猪IgG，所述检测线上包被有猪囊尾蚴活性蛋白GP50；编码所述猪囊尾蚴活性蛋白GP50的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明还涉及上述上转发光颗粒检测卡的制备方法，包括以下步骤：

S1、制备猪囊尾蚴活性蛋白GP50；