[发明专利]一种病理细胞分离吸附式提取方法

说明书

本发明提供了一种病理细胞分离吸附式提取方法，属于细胞提取领域，一种病理细胞分离吸附式提取方法，包括包括以下步骤：S1、收集胸膜炎胸水并储运；S2、制备混合液；S3、吸附式提取装置及吸附层安装准备；S4、添加步骤S2中制备的混合液，通过吸附层进行分离吸附式提取；S5、拆卸吸附层，提取分离的病理细胞；S6、将提取的病理细胞转移至培养基纯化培养，并进行冷冻储存。本发明通过带有吸附层的壳体结构设计，最大限度的保持细胞的活性，不破坏其结构，并且该方法也可通过多层吸附的方式分别对白细胞、红细胞、血小板这些非相关细胞进行分层分离，便于对病理细胞的提纯，具有市场前景，适合推广。

技术领域

本发明涉及细胞提取技术领域，尤其涉及一种病理细胞分离吸附式提取方法。

背景技术

胸膜炎可由于感染(细菌、病毒、霉菌、阿米巴、肺吸虫等)和感染因素，如肿瘤、变态反应、化学性和创伤性等多种疾病所引起。细菌感染所致的胸膜炎中，结核菌性胸膜炎最常见。引起胸膜炎的常见疾病：肺炎、肺栓塞所致的肺梗死、癌症、结核病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、寄生虫感染(如阿米巴病)、胰腺炎、损伤(如肋骨骨折)、由气道或其他部位到达胸膜的刺激物(如石棉)、药物过敏反应(如肼苯哒嗪、普鲁卡因酰胺、异烟肼、苯妥英、氯丙嗪)等。

病理检查已经大量应用于临床工作及科学研究。在临床方面主要进行尸体病理检查及手术病理检查。手术病理检查的目的，一是为了明确诊断及验证术前的诊断，提高临床的诊断水平；二是诊断明确后，可决定下步治疗方案及估计预后，进而提高临床的治疗水平，通过临床病理分析，也可获得大量极有价值的科研资料。

常规的胸膜炎胸水的病理细胞提取需要经过离心、沉淀、固定、切片这些操作，而在分离病理细胞的时候往往通过的是高速离心的方式，但这种方式难免会对一些细胞的活性产生一定程度的破坏。为此我们提出一种病理细胞分离吸附式提取方法来解决以上问题。

发明内容

为克服现有技术中存在的问题，本发明提供了一种病理细胞分离吸附式提取方法，可以通过带有吸附层的壳体结构设计，通过分离吸附的方式，在常压、低温状态下对相关病理提取液进行吸附式分离，最大限度的保持细胞的活性，不破坏其结构，并且该方法也可通过多层吸附的方式分别对白细胞、红细胞、血小板这些非相关细胞进行分层分离，便于对病理细胞的提纯，具有市场前景，适合推广。

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。

一种病理细胞分离吸附式提取方法，包括以下步骤：

S1、在手术室无菌环境下收集胸膜炎胸水，存放于无菌的储运盒中，贴好标签、条码，储运盒的温度保持在4-10℃，24小时内送达实验室；

S2、将储运盒中的胸膜炎胸水与生理盐水按3：1的比例混匀得混合液；

S3、将吸附式提取装置拆卸置于紫外线灭菌灯光下，灭菌30min，灭菌完成后，将吸附层安装在吸附式提取装置内；

S4、通过外力按压吸附式提取装置的壳体，使壳体内部呈负压状态，此时沿吸附式提取装置的入液口添加步骤S2中制备的混合液，通过吸附层进行分离吸附式提取；

S5、拆卸吸附层，根据病理细胞的直径从相应的吸附层中提取分离的胸膜炎病理细胞；

S6、将提取的病理细胞转移至培养基纯化培养，并进行冷冻储存。

本发明通过带有吸附层的壳体结构设计，通过分离吸附的方式，在常压、低温状态下对相关病理提取液进行吸附式分离，最大限度的保持细胞的活性，不破坏其结构，并且该方法也可通过多层吸附的方式分别对白细胞、红细胞、血小板这些非相关细胞进行分层分离，便于对病理细胞的提纯，具有市场前景，适合推广。