[发明专利]一种病理细胞分离吸附式提取方法在审
申请号: | 202110646750.6 | 申请日: | 2021-06-10 |
公开(公告)号: | CN113174361A | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 陈俊林;朱丹;施慧慧;马娟 | 申请(专利权)人: | 南通市第一老年病医院(上海大学附属南通医院;南通市第六人民医院;南通市肺科医院) |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07;C12M1/26;C12M1/38;C12M1/34 |
代理公司: | 南京禾祁专利代理事务所(普通合伙) 32462 | 代理人: | 黄天天 |
地址: | 226000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病理 细胞 分离 吸附 提取 方法 | ||
1.一种病理细胞分离吸附式提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、在手术室无菌环境下收集胸膜炎胸水,存放于无菌的储运盒中,贴好标签、条码,储运盒的温度保持在4-10℃,24小时内送达实验室;
S2、将储运盒中的胸膜炎胸水与生理盐水按3:1的比例混匀得混合液;
S3、将吸附式提取装置拆卸置于紫外线灭菌灯光下,灭菌30min,灭菌完成后,将吸附层(4)安装在吸附式提取装置内;
S4、通过外力按压吸附式提取装置的壳体(1),使壳体(1)内部呈负压状态,此时沿吸附式提取装置的入液口(21)添加步骤S2中制备的混合液,通过吸附层(4)进行分离吸附式提取;
S5、拆卸吸附层(4),根据病理细胞的直径从相应的吸附层(4)中提取分离的胸膜炎胸水病理细胞;
S6、将提取的病理细胞转移至培养基纯化培养,并进行冷冻储存。
2.根据权利要求1所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述吸附式提取装置的顶部通过螺纹结构可拆卸式连接有壳盖(2),所述壳体(1)为圆台型结构,所述吸附层(4)设置在壳盖(2)与壳体(1)间,所述入液口(21)设置在壳盖(2)上,所述壳体(1)底部滑动套接有底座(11),所述底座(11)与壳体(1)间夹接有阻尼弹簧(16)。
3.根据权利要求2所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述壳体(1)内固定有按压支架(13),所述按压支架(13)为圆管型结构,所述按压支架(13)的顶部插接设有吸管(3),所述吸管(3)包括胶头(32)和吸管嘴(31),所述述吸管(3)上还固定有与按压支架(13)相匹配的限位环(33)。
4.根据权利要求2所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述壳体(1)底部设有过液槽(14),所述底座(11)的内底固定有积液槽(12),所述底座(11)内壁固定有用于将提取液导入积液槽(12)的导液坡口(15),所述导液坡口(15)的顶部设有与过液槽(14)相匹配的密封垫(151)。
5.根据权利要求2所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述吸附芯(43)包括上连接环(41)、下连接环(42)和吸附芯(43),所述吸附芯(43)分为孔径不同的多层吸附结构,多层所述吸附结构呈锥形依次套接排布,所述吸附结构的锥面呈四十五倾斜度设置。
6.根据权利要求5所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述吸附结构的锥形内壁等距均分固定设有若干挡板(44),所述挡板(44)与吸附结构的锥形内壁垂直设置。
7.根据权利要求5所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述上连接环(41)与下连接环(42)相远离的一侧均设有环形卡扣(46),所述壳体(1)及壳盖(2)上均设有与环形卡扣(46)相匹配的卡扣槽。
8.根据权利要求5所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述上连接环(41)与吸附芯(43)间夹接有张紧装置(45),所述张紧装置(45)包括弹簧片(451)和张紧橡胶(452),所述弹簧片(451)呈剖面V字型的圆环结构,所述张紧橡胶(452)固定在弹簧片(451)的V型开口间,所述弹簧片(451)的顶侧与上连接环(41)的底侧胶接固定,所述吸附芯(43)的上端和下端分别与弹簧片(451)底端、下连接环(42)顶端胶接固定。
9.根据权利要求5所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述吸附芯(43)的多层吸附结构自内而外依次包括白细胞吸附层、红细胞吸附层和血小板吸附层,所述白细胞吸附层为尼龙纤维结构,所述白细胞吸附层的吸附孔径为10-20μm,所述红细胞吸附层为中性打孔吸附树胶结构,所述红细胞吸附层的吸附孔径为7-8μm,所述血小板吸附层为单壁碳纳米管无纺膜结构,所述血小板吸附层的吸附孔径为2-3μm。
10.根据权利要求2所述的一种吸附式提取装置,其特征在于:所述壳盖(2)顶部设有温度检测装置(22)和恒温装置(23),所述温度检测装置(22)的检测端和恒温装置(23)的输出端均延伸至壳体(1)内。
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