[发明专利]液相色谱串联质谱检测肾素活性过程中对影响ARR药物同步检测的方法

说明书

本发明提供了一种液相色谱串联质谱检测肾素活性过程中对影响ARR(血浆醛固酮与肾素活性比值)的治疗药物同步检测的方法，在通过液相色谱串联质谱检测血浆肾素活性的同时，实现对影响ARR数值的药物的定性筛查，可用于协助分析判断ARR为阴性、阳性、假阴性、或假阳性。在对样本进行蛋白沉淀的同时，实现对血管紧张素I和43种高血压治疗药物的有效提取；利用液相色谱串联质谱技术的高通量、高特异性、高灵敏度的特性，对提取样本进行包括血管紧张素I以及43种高血压治疗药物等多指标的同步检测；利用筛查药物的MRM质谱参数进行药物的初筛，并根据药物的保留时间进行复核。ARR检测值联合药物筛查结果共同分析，在避免患者停止药物治疗的同时，有效辨别检测的假阳性或假阴性结果，提高实际原发性醛固酮增多症和临床肾素活性检测的准确性，便于临床推广和应用。

本申请主张中国在先申请,申请号:2021106145678，申请日2021年6月2日的优先权；其所有的内容作为本发明的一部分。

技术领域

本发明涉及化学分析技术领域，具体而言，涉及一种原发性醛固酮增多症的定性检测方法，尤其涉及一种血浆醛固酮浓度(PAC)/血浆肾素活性(PRA)的比值ARR的检测及判断方法。

背景技术

原发性醛固酮增多症(PA，简称原醛症)是一种常见的内分泌性高血压，其特点是肾上腺皮质自主分泌醛固酮，导致体内潴钠排钾，血容量增多，肾素-血管紧张素系统活性受抑制，临床主要表现为高血压和低血钾。

血浆醛固酮浓度(PAC)/血浆肾素活性(PRA)的比值ARR是筛查原发性醛固酮增多症的最可靠方法。其中血浆肾素活性是衡量在肾素催化下，外周血中血管紧张素I产生效率的指数，在肾素血管紧张素醛固酮系统(RAAS)所致高血压的分型诊断中有重要意义。

2010年由中华医学会内分泌学分会牵头，在全国11个省19个中心对1656例难治性高血压患者进行了原醛症的筛查，报道其患病率为7.1％。李启富教授团队发表的研究表明，原醛症在新诊断高血压中的发生率超过4.0％。在2020版《原发性醛固酮增多症诊断治疗的专家共识》中将ARR作为原醛症首选筛查指标，且认为对高血压特别是难治性高血压及新诊断高血压人群进行原醛症的筛查对临床工作有着现实的指导意义，并推荐对所有新诊断的高血压患者进行原醛症筛查。

在专家共识中进一步指出，ARR数值会受到包括年龄、性别、饮食、服用药物、体位、血钾及肌酐等多种因素的影响，可能导致假阳性或假阴性结果，其中尤其需对使用的治疗药物进行关注。共识要求，ARR的检测须在停用对ARR数值影响较大的药物至少四周时进行，以避免假阳性或假阴性结果；需要特别注意的是ACE抑制剂(ACE-Is)、二氢吡啶钙通道阻滞剂(CCBs)和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARBs)，可通过降低PAC和大幅升高PRA水平从而降低ARR，导致假阴性的检测结果，需停用上述药物至少2周再次进行检测。但由于原醛症经常会引起严重的高血压，因此停药对患者是有潜在危害的。

ARR测定包括血浆醛固酮(PAC)与血浆肾素活性(PRA)，目前普遍采用放射免疫法测定PRA，通过单位时间单位体积内血管紧张素原转变为血管紧张素Ⅰ的速率间接反映血浆中的肾素活性水平。大多数中心亦采用放射免疫法测定血醛固酮(PAC)。免疫法测定肾素活性和醛固酮含量，存在免疫法固有的特异性差、存在交叉偶联反应等缺陷，而且无法实现对影响ARR数值的高血压治疗药物的筛查，患者需要面临停药检测的风险。

因此急需找到一种更简单便利的ARR的检测方法，既能避免患者停止药物治疗，又能有效减低原发性醛固酮增多症检测的假阳性或假阴性结果，提高临床实际ARR和肾素活性检测的准确性。

发明内容