[发明专利]三重数字微滴PCR检测猪圆环病毒的方法、引物、探针和试剂盒

权利要求书

1.检测靶点在检测猪圆环病毒中的应用，所述的检测为非疾病的检测与诊断方法，其特征在于，检测靶点包括以下检测靶点中的一种或多种：

猪圆环病毒1型(PCV1)检测靶点的序列如SEQ ID NO:1所示；

猪圆环病毒2型(PCV2)检测靶点的序列如SEQ ID NO:2所示；

猪圆环病毒3型(PCV3)检测靶点的序列如SEQ ID NO:3所示。

2.一种检测猪圆环病毒的检测靶点的引物，其特征在于，检测靶点包括以下检测靶点中的一种或多种：

PCV1的检测靶点的序列如SEQ ID NO:1所示；

PCV2的检测靶点的序列如SEQ ID NO:2所示；

PCV3的检测靶点的序列如SEQ ID NO:3所示。

3.根据权利要求2所述的引物，其特征在于，引物包括以下的一种或多种：

PCV1的检测靶点的引物

FP1：GGTGTGGCGGGAGGAGTAG

RP1：TTGGGTCCACTGTTGTTAT；

PCV2的检测靶点的引物

FP2：GAAATGGTATTTGGGTGCCC

RP2：ACTCCGTTGTCCTTGAGATC；

PCV3的检测靶点的引物

FP3：GTGCCGTAGAAGTCTGTCATTC

RP3：CAGGACAAAGCCTCTTCTTTTT。

4.一种检测猪圆环病毒的检测靶点的探针，其特征在于，检测靶点包括以下检测靶点中的一种或多种：

PCV1的检测靶点的序列如SEQ ID NO:1所示；

PCV2的检测靶点的序列如SEQ ID NO:2所示；

PCV3的检测靶点的序列如SEQ ID NO:3所示。

5.根据权利要求4所述的探针，其特征在于，探针包括以下的一种或多种：

PCV1的检测靶点的探针P1：CCAAGTTGGTGGAGGGGGTT；

PCV2的检测靶点的探针P2：AGCGAAAGGAACAGATCAGC

PCV3的检测靶点的探针P3：ATAAATGCTCCAAAGCAGTGCTCC。

6.根据权利要求5所述的探针，其特征在于，PCV3的探针P3以HEX作为荧光发光基团，PCV2探针标记FAM荧光基团，PCV1探针P1以Cy5作为发光基团。

7.一种试剂盒，该试剂盒包括：

权利要求2或3所述的引物；

和/或，权利要求4或5或6所述的探针。

8.三重数字微滴PCR检测猪圆环病毒的方法，该方法为非疾病的检测与诊断方法，该方法包括以下的步骤：配制PCR反应体系、芯片上样、微滴生成、扩增反应和微滴信号读取与分析；其特征在于，PCR反应体系的引物采用权利要求2或3所述的引物，芯片采用权利要求4或5或6所述的探针。