[发明专利]一种特异性扩增目的基因的分子锁及应用有效
申请号: | 202110632780.1 | 申请日: | 2021-06-07 |
公开(公告)号: | CN113215163B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 陈华;谭淼 | 申请(专利权)人: | 苏州海苗生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12Q1/6848;C12Q1/6858 |
代理公司: | 南京艾普利德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32297 | 代理人: | 张铂 |
地址: | 215434 江苏省苏州市太仓*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 特异性 扩增 目的 基因 分子 应用 | ||
1.一种组合物在制备用于抑制背景基因扩增从而促进目的基因特异性扩增的试剂中的应用,其特征在于所述组合物包括核酸片段和DNA-RNA 杂合双链抗体,所述核酸片段包含RNA 碱基,核酸片段与背景基因序列互补,并包含背景基因与目的基因之间的差异位点,所述核酸片段与背景基因上包含差异位点的序列,形成DNA-RNA杂合双链,从而被DNA-RNA杂合双链抗体识别并结合形成具有稳定结构的双链核酸-抗体复合体,阻碍扩增体系中的DNA引物与背景基因模板退火结合或阻碍已与背景基因模板退火结合的DNA 引物 3’端被DNA多聚酶延伸,从而抑制背景基因的扩增,促进目的基因特异性扩增,所述扩增为聚合酶链式反应。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述DNA-RNA 杂合双链抗体选自与DNA-RNA杂合双链特异性结合的单克隆抗体S9.6。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述DNA-RNA 杂合双链抗体选自DNA-RNA杂合双链兔源单克隆抗体。
4.根据权利要求 1 所述的应用,其特征在于所述核酸片段还包括DNA核苷酸。
5.根据权利要求 4 所述的应用,其特征在于所述核酸片段中的碱基被修饰,所述修饰选自甲基化、羟甲基化、生物素标记中的一种或几种。
6.一种组合物在制备目的基因检测试剂中的应用,其特征在于所述组合物包括核酸片段和DNA-RNA 杂合双链抗体,所述核酸片段包含RNA 碱基,核酸片段与背景基因序列互补,并包含背景基因与目的基因之间的差异位点,所述核酸片段与背景基因上包含差异位点的序列,形成DNA-RNA杂合双链,从而被DNA-RNA杂合双链抗体识别并结合形成具有稳定结构的双链核酸-抗体复合体,阻碍扩增体系中的DNA引物与背景基因模板退火结合或阻碍已与背景基因模板退火结合的DNA 引物 3’端被DNA多聚酶延伸,从而抑制背景基因的扩增,促进目的基因特异性扩增,所述扩增为聚合酶链式反应。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于所述基因检测为以核酸序列缺失和/或核酸序列替换中的一种或几种基因突变为靶标进行的基因检测。
8.一种组合物在制备疾病诊断试剂中的应用,其特征在于所述组合物包括核酸片段和DNA-RNA 杂合双链抗体,所述核酸片段包含RNA 碱基,核酸片段与背景基因序列互补,并包含背景基因与目的基因之间的差异位点,所述核酸片段与背景基因上包含差异位点的序列,形成DNA-RNA杂合双链,从而被DNA-RNA杂合双链抗体识别并结合形成具有稳定结构的双链核酸-抗体复合体,阻碍扩增体系中的DNA引物与背景基因模板退火结合或阻碍已与背景基因模板退火结合的DNA 引物 3’端被DNA多聚酶延伸,从而抑制背景基因的扩增,促进目的基因特异性扩增,所述扩增为聚合酶链式反应。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于所述疾病包括肿瘤、遗传异常、代谢异常或耐药病原体感染引起的疾病。
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