[发明专利]一类含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽的合成方法

说明书

本发明公开了一类含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽的合成方法，该方法是以Fmoc‑L‑Glu‑OTrt或Fmoc‑L‑Asp‑OTrt为起始原料，以其侧链羧基连接固相载体RinkAmide AM Resin，以Fmoc‑L‑AA(X)‑OH(AA指α‑氨基酸，X为α‑氨基酸的侧链保护基)为连接的第二个氨基酸，完成连接后，用哌啶/DMF脱掉Fmoc保护基，用三氟乙醇/醋酸的DCM溶液脱掉羧基上的Trt保护基，让羧基裸露出来，最后在PyBop、DIEA的DMF溶液中让树脂肽上裸露的氨基和羧基自行环合成环二肽并挂在树脂上，经过切割，使环二肽脱落下来，在乙醚中沉淀生成含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽。本发明合成方法简单、操作安全，易于纯化，适合规模化操作，可批量合成含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽。

技术领域

本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及一类含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽的合成方法。

背景技术

环二肽(cyclic dipeptides)，又名2,5-二酮哌嗪(2,5-diketopiperazines)，是一自然界中最小的环肽，这类化合物在人、脊椎动物、无脊椎动物、植物、真菌和细菌中均有发现。由于环二肽形成了一个稳定的六元环结构，具有一定的构象约束作用。有两个氢键给体和两个氢键受体，氢键是药物与受体相互作用的主要方式之一，因此环二肽在药物化学中是一个重要的药效团。目前发现的一些环二肽具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤等生物活性，因此环二肽及其衍生物常被作为候选物，一直受到合成化学家和生物学家及药物学家的追捧。

L-天冬酰胺作为人体非必需的氨基酸，它广泛分布在植物界，可以从芦笋、甜菜根、豌豆、蚕豆中分离得到。作为一种药物，天冬酰胺也常用于扩张支气管、平喘、抗消化性溃疡及胃功能障碍的治疗，在食品、医药、轻化工和水环保方面具有广泛的用途。L-谷氨酰胺在体内可转变成为糖胺，作为合成粘蛋白的前体，可促进溃疡愈合，主要用作消化道溃疡药。此外，还可用作脑功能改善剂和用于治疗酒精中毒。当前，有很多含有天冬酰胺、谷氨酰胺环二肽的合成及其生物活性报道。

含有天冬酰胺、谷氨酰胺的环二肽的合成方法有经典液相合成法和固相合成法，其中液相合成法采取最大保护策略，从N端到C端合成，采取活泼酯法或对称酸酐法，合成得到全保护二肽甲酯片段，氨酯交换环合，液相合成周期长，且二肽甲酯片段需要柱层析；固相合成法包括直接缩合法和分子内氨解法，分子内氨解法多选用Oxime树脂，以肟为Linker的载体，形成羧酸肟酯，亲核活性高，但树脂昂贵，应用较少；直接缩合法采取Fmoc/tBu/OAL正交策略或Fmoc/tBu/Dmab正交策略，合成线性二肽，脱除N端和C端保护，在固相载体上直接缩合得到目标环肽。采用Fmoc/tBu/OAL正交策略，须使用高毒试剂3-溴丙烯，安全性低，且脱保护须使用过渡金属催化剂钯，对空气敏感且价格昂贵，脱保护反应的试剂残留影响环合反应的发生；采用Fmoc/tBu/Dmab正交策略，羧基保护基需使用2-{1-[4-(羟甲基)苯氨基]-3-甲基亚丁基}-5,5-二甲基-1,3-环己二酮(Dmab-OH)，价格约2400元/g，价格昂贵，脱保护需使用水合肼，增加了合成步骤，故应用较少。

发明内容

本发明的目的是提供一种合成工艺简单、成功率高、适用性广、可批量化合成的含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽的方法。

本发明所述含天冬酰胺或谷氨酰胺的环二肽的结构式为：

其中，式Ⅰ为含谷氨酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Asn)，式Ⅱ为含天冬酰胺的环二肽，其分子通式为Cyclo(AA-Gln)，分子通式中AA代表α-氨基酸，式Ⅰ和式Ⅱ中R为α-氨基酸的侧链，所述合成方法由下述步骤组成：