[发明专利]一种通过串联质谱法测定特异性有机酸的方法

权利要求书

1.一种通过串联质谱法测定特异性有机酸的方法，所述特异性有机酸为：甲基丙二酸、3-羟基丙酸、甲基枸橼酸、N-巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸、3-甲基巴豆酰甘氨酸、异戊酰甘氨酸、丙酰甘氨酸、戊二酸、3-羟基戊二酸、2-甲基-3-羟基丁酸、3-甲基戊二酸、3-甲基戊烯二酸、3-羟基-3-甲基戊二酸，其特征在于，通过以下技术方案实现：

(1)溶液及样本溶液的制备

对照品溶液：选取甲基丙二酸、3-羟基丙酸、甲基枸橼酸、N-巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸、3-甲基巴豆酰甘氨酸、异戊酰甘氨酸、丙酰甘氨酸、戊二酸、3-羟基戊二酸、2-甲基-3-羟基丁酸、3-甲基戊二酸、3-甲基戊烯二酸、3-羟基-3-甲基戊二酸作为对照品，精密称定，分别用体积比为1:1的甲醇水溶液为溶剂配制成对照品储备溶液，用于标准曲线的建立及加标回收率实验，各对照品溶液中，对照品的浓度为1000mg/L；

样本溶液：将待测样本摇匀，取10μL尿样并使用体积比为1:1的甲醇水溶液稀释100倍，充分摇匀，若样本浓度过高，则稀释至标准曲线范围内，稀释液在12000rpm，4℃下离心10分钟，将上层清液转移到96孔板上，备用；

(2)有机酸测定

用吸取200μL样本溶液置于96孔板，待仪器稳定后进行分析，

检测条件：使用Waters公司的串联质谱系统：Acquity TQD三重四极杆搭配电喷雾离子源、1525μBinary液相泵和Waters 2777C自动进样器，使用氮气作为脱溶剂气，高纯氩气作为碰撞气，离子源使用ESI(-)离子模式，

检测方式：为多重反应选择离子检测模式，定量方式为标准曲线法，进样体积为10μL，流动相为：83:10:7的甲醇:异丙醇:0.1％氨水，所使用的洗针液为40:10:50的甲醇:异丙醇:水，离子源温度为150℃，毛细管电压为3.0kV，脱溶剂气温度为400℃，脱溶剂气为N₂，流量为650L/h，锥孔气流量为50L/h，14种物质的驻留时间均设置为0.035s，通过检测系列浓度对照品溶液，以对照品溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标建立标准曲线，并采用标准曲线法获得样品中的有机酸的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述待测样本为尿液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)通过Waters公司的IntelliStart程序分别对目标物的锥孔电压和碰撞能量进行优化，并选择最优参数。

4.权利要求1所述的方法在快速测定样液中的特异性有机酸中应用。