[发明专利]一种多重信号放大系统及其在组织细胞病理检测中的应用有效

专利信息
申请号: 202110631383.2 申请日: 2021-06-07
公开(公告)号: CN113355396B 公开(公告)日: 2022-02-22
发明(设计)人: 刘密;彭作富 申请(专利权)人: 艾克发(北京)生物技术有限公司
主分类号: C12Q1/682 分类号: C12Q1/682;C12Q1/6804;G01N33/53
代理公司: 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 代理人: 尹玮
地址: 100260 北京市*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 多重 信号 放大 系统 及其 组织细胞 病理 检测 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种非疾病诊断目的的利用多重信号放大系统进行检测的方法,其特征在于,包括下述步骤:

(1)组织切片、细胞涂片进行前期预处理后,进行抗原修复;

(2)根据待测抗原种类,加入相应的抗体-DNA/RNA连接链,作用一定时间,洗涤;

(3)加入DNA/RNA放大链,作用一定时间;

(4)加入DNA/RNA检测链,反应一定时间;

(5)组织切片、细胞涂片洗涤后封片;

(6)对DNA/RNA检测链上的信号进行检测;

所述DNA/RNA连接链、DNA/RNA放大链、DNA/RNA检测链为以下序列组合中的一组或多组:

第1组:

DNA/RNA连接链: AAAUUCCUCUACCACCUACA;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;

第2组:

DNA/RNA连接链: AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;

第3组:

DNA/RNA连接链: AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;

第4组:

DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTT;

DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATGATGATG-T-ATGATGATG-T;

第5组:

DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTTCGATCTAG;

DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATGATGATG-T-ATGATGATG-T;

第6组:

DNA/RNA连接链: AATTCTATGACACCGCCACGCCCTATATCCTCGCAATAACCC;

DNA/RNA放大链:GGGTTATTGCGAGGATATAGGGCGTGGCGGTGTCATAGAATT-TT-AATACTCTC-A-(AATACTCTC-A)n-AATACTCTC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-T;

第7组:

DNA/RNA连接链:GTTTCCTATATTTAGCGTCCGTGTCGTTCTCCCGCGCAACAG;

DNA/RNA放大链: CTGTTGCGCGGGAGAACGACACGGACGCTAAATATAGGAAAC-TT-A-CAACTTAAC-A-(CAACTTAAC-A)n-CAACTTAAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-T;

第8组:

DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;

DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;

第9组:

DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;

DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;

第10组:

DNA/RNA连接链:CAAGTCTAGTCCAAGGTCCGTCAAGGTCTCCGACGCATACTC;

DNA/RNA放大链:GAGTATGCGTCGGAGACCTTGACGGACCTTGGACTAGACTTG-TT-CAATCAAAA-A-(CAATCAAAA-A)n-CAATCAAAA-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-TTTTGATTG-T-TTTTGATTG-T;

第11组:

DNA/RNA连接链:AGTTCCTGTAGTATCCCGTCGCATAGTCGTACATTCACCGTC;

DNA/RNA放大链:GACGGTGAATGTACGACTATGCGACGGGATACTACAGGAACT-TT-CCAATAATA-A-(CCAATAATA-A)n-CCAATAATA-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-TATTATTGG-T-TATTATTGG-T;

第12组:

DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACA;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;

第13组:

DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACA;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;

第14组:

DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;

第15组:

DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;

第16组:

DNA/RNA连接链:AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;

第17组:

DNA/RNA连接链:AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;

DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;

DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;

第18组:

DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTT;

DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;

DNA/RNA放大链:ATGATGATG-T-ATGATGATG-T-ATGATGATG-TTT-TTTTCTACC-A-(TTTTCTACC-A)n-TTTTCTACC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GGTAGAAAA-T-GGTAGAAAA-T;

第19组:

DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTTCGATCTAG;

DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;

DNA/RNA放大链:ATGATGATG-T-ATGATGATG-T-ATGATGATG-TTT-TTTTCTACC-A-(TTTTCTACC-A)n-TTTTCTACC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GGTAGAAAA-T-GGTAGAAAA-T;

第20组:

DNA/RNA连接链:AATTCTATGACACCGCCACGCCCTATATCCTCGCAATAACCC;

DNA/RNA放大链:GGGTTATTGCGAGGATATAGGGCGTGGCGGTGTCATAGAATT-TT-AATACTCTC-A-(AATACTCTC-A)n-AATACTCTC-A;

DNA/RNA放大链:GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-TTT-TCCTTTTAT-A-(TCCTTTTAT-A)n-TCCTTTTAT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATAAAAGGA-T-ATAAAAGGA-T;

第21组:

DNA/RNA连接链:GTTTCCTATATTTAGCGTCCGTGTCGTTCTCCCGCGCAACAG;

DNA/RNA放大链: CTGTTGCGCGGGAGAACGACACGGACGCTAAATATAGGAAAC-TT-A-CAACTTAAC-A-(CAACTTAAC-A)n-CAACTTAAC-A;

DNA/RNA放大链:GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-TTT-CCTTCTATT-A-(CCTTCTATT-A)n-CCTTCTATT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AATGAAAGA-T-AATGAAAGA-T;

第22组:

DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;

DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;

DNA/RNA放大链:GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-TTT-TTATTCACT-A-TTATTCACT-A-(TTATTCACT-A)n-TTATTCACT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AGTGAATAA-T-AGTGAATAA-T;

第23组:

DNA/RNA连接链:CAAGTCTAGTCCAAGGTCCGTCAAGGTCTCCGACGCATACTC;

DNA/RNA放大链:GAGTATGCGTCGGAGACCTTGACGGACCTTGGACTAGACTTG-TT-CAATCAAAA-A-(CAATCAAAA-A)n-CAATCAAAA-A;

DNA/RNA放大链:TTTTGATTG-T-TTTTGATTG-T-TTTTGATTGTTT-TCATTACTT-A-TCATTACTT-A-(TCATTACTT-A)n-TCATTACTT-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AAGTAATGA-T-AAGTAATGA-T;

第24组:

DNA/RNA连接链:AGTTCCTGTAGTATCCCGTCGCATAGTCGTACATTCACCGTC;

DNA/RNA放大链:GACGGTGAATGTACGACTATGCGACGGGATACTACAGGAACT-TT- CCAATAATA-A-(CCAATAATA-A)n-CCAATAATA-A;

DNA/RNA放大链:TATTATTGG-T-TATTATTGG-T-TATTATTGG-TTT-TTCTTACTC-A-TTCTTACTC-A-(TTCTTACTC-A)n-TTCTTACTC-A;

DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GAGTAAGAA-T-GAGTAAGAA-T;

所述n的范围为5≤n≤250;

序列从左到右为序列的5’端到3’端。

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