[发明专利]一种多重信号放大系统及其在组织细胞病理检测中的应用有效
申请号: | 202110631383.2 | 申请日: | 2021-06-07 |
公开(公告)号: | CN113355396B | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
发明(设计)人: | 刘密;彭作富 | 申请(专利权)人: | 艾克发(北京)生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682;C12Q1/6804;G01N33/53 |
代理公司: | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 | 代理人: | 尹玮 |
地址: | 100260 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多重 信号 放大 系统 及其 组织细胞 病理 检测 中的 应用 | ||
1.一种非疾病诊断目的的利用多重信号放大系统进行检测的方法,其特征在于,包括下述步骤:
(1)组织切片、细胞涂片进行前期预处理后,进行抗原修复;
(2)根据待测抗原种类,加入相应的抗体-DNA/RNA连接链,作用一定时间,洗涤;
(3)加入DNA/RNA放大链,作用一定时间;
(4)加入DNA/RNA检测链,反应一定时间;
(5)组织切片、细胞涂片洗涤后封片;
(6)对DNA/RNA检测链上的信号进行检测;
所述DNA/RNA连接链、DNA/RNA放大链、DNA/RNA检测链为以下序列组合中的一组或多组:
第1组:
DNA/RNA连接链: AAAUUCCUCUACCACCUACA;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;
第2组:
DNA/RNA连接链: AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;
第3组:
DNA/RNA连接链: AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-UAGGUUUAU-U-UAGGUUUAU-U;
第4组:
DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTT;
DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATGATGATG-T-ATGATGATG-T;
第5组:
DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTTCGATCTAG;
DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATGATGATG-T-ATGATGATG-T;
第6组:
DNA/RNA连接链: AATTCTATGACACCGCCACGCCCTATATCCTCGCAATAACCC;
DNA/RNA放大链:GGGTTATTGCGAGGATATAGGGCGTGGCGGTGTCATAGAATT-TT-AATACTCTC-A-(AATACTCTC-A)n-AATACTCTC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-T;
第7组:
DNA/RNA连接链:GTTTCCTATATTTAGCGTCCGTGTCGTTCTCCCGCGCAACAG;
DNA/RNA放大链: CTGTTGCGCGGGAGAACGACACGGACGCTAAATATAGGAAAC-TT-A-CAACTTAAC-A-(CAACTTAAC-A)n-CAACTTAAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-T;
第8组:
DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;
DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;
第9组:
DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;
DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;
第10组:
DNA/RNA连接链:CAAGTCTAGTCCAAGGTCCGTCAAGGTCTCCGACGCATACTC;
DNA/RNA放大链:GAGTATGCGTCGGAGACCTTGACGGACCTTGGACTAGACTTG-TT-CAATCAAAA-A-(CAATCAAAA-A)n-CAATCAAAA-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-TTTTGATTG-T-TTTTGATTG-T;
第11组:
DNA/RNA连接链:AGTTCCTGTAGTATCCCGTCGCATAGTCGTACATTCACCGTC;
DNA/RNA放大链:GACGGTGAATGTACGACTATGCGACGGGATACTACAGGAACT-TT-CCAATAATA-A-(CCAATAATA-A)n-CCAATAATA-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-TATTATTGG-T-TATTATTGG-T;
第12组:
DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACA;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;
第13组:
DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACA;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;
第14组:
DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;
第15组:
DNA/RNA连接链:AAAUUCCUCUACCACCUACAUCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;
第16组:
DNA/RNA连接链:AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A- (ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T;
第17组:
DNA/RNA连接链:AAATTCCTCTACCACCTACATCAC;
DNA/RNA放大链:GTGATGTAGGTGGTAGAGGAATTT-TT-ATAAACCTA-A-(ATAAACCTA-A)n-ATAAACCTA-A;
DNA/RNA放大链:TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-T-TAGGTTTAT-TTT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-UU-GUAAAUGAA-U-GUAAAUGAA-U;
第18组:
DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTT;
DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;
DNA/RNA放大链:ATGATGATG-T-ATGATGATG-T-ATGATGATG-TTT-TTTTCTACC-A-(TTTTCTACC-A)n-TTTTCTACC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GGTAGAAAA-T-GGTAGAAAA-T;
第19组:
DNA/RNA连接链:TATTTAGTGTTCGAATAGTTCGATCTAG;
DNA/RNA放大链:CTAGATCGAACTATTCGAACACTAAATA-TT-CATCATCAT-A-(CATCATCAT-A)n-CATCATCAT-A;
DNA/RNA放大链:ATGATGATG-T-ATGATGATG-T-ATGATGATG-TTT-TTTTCTACC-A-(TTTTCTACC-A)n-TTTTCTACC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GGTAGAAAA-T-GGTAGAAAA-T;
第20组:
DNA/RNA连接链:AATTCTATGACACCGCCACGCCCTATATCCTCGCAATAACCC;
DNA/RNA放大链:GGGTTATTGCGAGGATATAGGGCGTGGCGGTGTCATAGAATT-TT-AATACTCTC-A-(AATACTCTC-A)n-AATACTCTC-A;
DNA/RNA放大链:GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-T-GAGAGTATT-TTT-TCCTTTTAT-A-(TCCTTTTAT-A)n-TCCTTTTAT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-ATAAAAGGA-T-ATAAAAGGA-T;
第21组:
DNA/RNA连接链:GTTTCCTATATTTAGCGTCCGTGTCGTTCTCCCGCGCAACAG;
DNA/RNA放大链: CTGTTGCGCGGGAGAACGACACGGACGCTAAATATAGGAAAC-TT-A-CAACTTAAC-A-(CAACTTAAC-A)n-CAACTTAAC-A;
DNA/RNA放大链:GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-T-GTTAAGTTG-TTT-CCTTCTATT-A-(CCTTCTATT-A)n-CCTTCTATT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AATGAAAGA-T-AATGAAAGA-T;
第22组:
DNA/RNA连接链:GAATCCAAATCGTCCGTTAGCAGTGAACCGTACCGTCTCAAT;
DNA/RNA放大链:ATTGAGACGGTACGGTTCACTGCTAACGGACGATTTGGATTC-TT-TTCATTTAC-A-(TTCATTTAC-A)n-TTCATTTAC-A;
DNA/RNA放大链:GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-T-GTAAATGAA-TTT-TTATTCACT-A-TTATTCACT-A-(TTATTCACT-A)n-TTATTCACT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AGTGAATAA-T-AGTGAATAA-T;
第23组:
DNA/RNA连接链:CAAGTCTAGTCCAAGGTCCGTCAAGGTCTCCGACGCATACTC;
DNA/RNA放大链:GAGTATGCGTCGGAGACCTTGACGGACCTTGGACTAGACTTG-TT-CAATCAAAA-A-(CAATCAAAA-A)n-CAATCAAAA-A;
DNA/RNA放大链:TTTTGATTG-T-TTTTGATTG-T-TTTTGATTGTTT-TCATTACTT-A-TCATTACTT-A-(TCATTACTT-A)n-TCATTACTT-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-AAGTAATGA-T-AAGTAATGA-T;
第24组:
DNA/RNA连接链:AGTTCCTGTAGTATCCCGTCGCATAGTCGTACATTCACCGTC;
DNA/RNA放大链:GACGGTGAATGTACGACTATGCGACGGGATACTACAGGAACT-TT- CCAATAATA-A-(CCAATAATA-A)n-CCAATAATA-A;
DNA/RNA放大链:TATTATTGG-T-TATTATTGG-T-TATTATTGG-TTT-TTCTTACTC-A-TTCTTACTC-A-(TTCTTACTC-A)n-TTCTTACTC-A;
DNA/RNA检测链:修饰物-TT-GAGTAAGAA-T-GAGTAAGAA-T;
所述n的范围为5≤n≤250;
序列从左到右为序列的5’端到3’端。
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