[发明专利]一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法及其应用在审

专利信息
申请号: 202110616656.6 申请日: 2021-06-02
公开(公告)号: CN113429469A 公开(公告)日: 2021-09-24
发明(设计)人: 牟海津;梁青平;刘哲民 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/80;A23K20/147
代理公司: 北京载博知识产权代理事务所(普通合伙) 11116 代理人: 韦群
地址: 266061 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 家蚕 抗菌 bmglva2 重组 蛋白 制备 方法 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法,其特征在于所述重组蛋白通过易错PCR方法筛选获得。

2.根据权利要求1所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法,其特征在于,所述PCR方法包含以下步骤:

S1;通过PCR反应对抗菌肽目的片段进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳检验后获得易错PCR片段;

S2:使用高保真酶制备表达载体的线性化片段,经琼脂糖凝胶电泳检验和产物回收纯化后与制备的目的PCR片段进行同源重组连接,热激法转入大肠杆菌DH5α感受态构建大肠杆菌突变体库;

S3:将筛选的阳性转化子均转入表达宿主里氏木霉Tu6中,进行第二轮阳性转化子的筛选;

S4:筛选出的转化子通过摇瓶发酵获得表达产物,经96孔板对其抑菌活性验证后,筛选得到所述提供的家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白。

3.根据权利要求2所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法,其特征在与,所述重组蛋白的氨基酸序列。

4.根据权利要求2所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法,其特征在于,所述重组蛋白表达的的重组载体。

5.根据权利要求2所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白制备方法,其特征在于,所述重组蛋白的重组菌株,所述重组菌株的宿主为里氏木霉Tu6。

6.根据权利要求1-5所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白的应用,其特征在于,所述重组抗菌肽在饲料或饲料添加剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白的应用,其特征在于,所述重组菌株在饲料或饲料添加剂中的应用。

8.根据权利要求6所述的一种家蚕抗菌肽BMGlvA2重组蛋白的应用,其特征在于,所述重组载体在饲料或饲料添加剂中的应用。

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