[发明专利]一种荆防合剂的质量检测方法

权利要求书

1.一种荆防合剂的质量检测方法，包括采用薄层色谱法鉴别荆芥和川芎，具体包括如下步骤：

A、供试品溶液的制备 取荆防合剂加水和乙酸乙酯，通过挥发油测定器提取，取乙酸乙酯层即为供试品溶液；

B、对照品溶液制备 称取胡薄荷酮对照品，加甲醇稀释定容作为荆芥鉴别的对照品溶液；取川芎对照药材，加甲醇稀释，超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇定容作为川芎鉴别的对照药材溶液；

C、点样、展开 吸取上述3种 溶液各5~15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60~90℃石油醚-乙酸乙酯，体积比为9:1为展开剂，展开，取出晾干；

川芎对照药材置紫外灯下365nm检视，供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点鉴别川芎；

胡薄荷酮对照品在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品胡薄荷酮色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点鉴别荆芥；

采用薄层色谱法鉴别羌活，具体包括如下步骤：

A、供试品溶液制备 取荆防合剂，加乙酸乙酯振摇提取，水液I备用，乙酸乙酯层蒸干，残渣加水溶解后上聚酰胺柱，分别经水和乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解即得供试品溶液；

B、对照品溶液制备 称定紫花前胡苷对照品，加甲醇溶解即得羌活鉴别的对照品溶液；

C、点样、展开 将供试品溶液和对照品溶液各5~15μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6:1三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显蓝色的荧光斑点鉴别羌活；

采用薄层色谱法鉴别防风，具体包括如下步骤：

A、供试品溶液的制备 取羌活鉴别项下水液I，加入正丁醇，摇匀，用氨试液洗涤，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇溶解即得供试品溶液；

B、对照品溶液的配制 称取升麻素苷对照品，加甲醇溶解配制成鉴别防风的对照品溶液；

C、点样、展开 取供试品和对照品溶液各5~15μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为5:1三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点鉴别防风；

采用薄层色谱法鉴别柴胡，具体包括如下步骤：

A、供试品溶液的制备 取荆防合剂，加乙酸乙酯振摇提取，乙酸乙酯层用氨试液洗涤，弃去氨试液，将乙酸乙酯层蒸干，残渣加甲醇溶解，再滴加稀盐酸作为供试品溶液；

B、对照品溶液的制备 称取柴胡皂苷d，加甲醇溶解后再滴加稀盐酸作为对照品溶液；

C、点样、展开 取供试品和对照品溶液各1~10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以10℃下放置体积比为13:7:2三氯甲烷-甲醇-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点鉴别柴胡；

采用薄层色谱法鉴别甘草，具体步骤如下：

A、供试品溶液的制备 取荆防合剂，加稀盐酸，超声后离心，弃去上清液，沉淀加碳酸氢氨溶液溶解，用水的水饱和的正丁醇溶液振摇提取，弃去正丁醇层，加入冰醋酸，水饱和的正丁醇溶液萃取，收集正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解作为供试品溶液；

B、对照品溶液制备 称取甘草酸铵对照品，加甲醇溶解作为甘草鉴别的对照品溶液；

C、点样、展开 取供试品和对照品溶液各5~15μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为15:1:1:2乙酸乙酯：甲酸：冰醋酸：水为展开剂，展开，取出，晾干，置于254nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱上相应的位置上，显相同颜色的斑点鉴别甘草；

同时提供了采用高效液相色谱法测定紫花前胡苷、柚皮苷、新橙皮苷，具体包括如下步骤：

A、供试品溶液的配制 精密量取荆防合剂置于容量瓶中，加入稀释剂稀释并定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液即得供试品溶液；

B、对照品溶液的配制 分别精密称定紫花前胡苷、柚皮苷、新橙皮苷对照品，分别置于容量瓶中加入稀释剂稀释定容得各对照品溶液；

C、HPLC检测 将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照如下的色谱条件进行测定：

色谱柱：十八烷基硅烷键合色谱柱；流动相：乙腈-0.05~0.3%甲酸或磷酸水溶液；流速：0.8~1.2ml/min；检测器：二极管阵列检测器；波长：紫花前胡苷检测波长为330~340nm，柚皮苷和新橙皮苷的检测波长为280~285nm；进样量：5~20μl；

梯度洗脱程序如下：

D、记录色谱图，由对照品中各组分保留时间定性，按照外标法计算供试品中的紫花前胡苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量。