[发明专利]一种引发溶血性输血反应和严重新生儿溶血病的RHCE血型基因的SNP位点

说明书

本发明的目的是提供一种用于检测RhCE血型系统变异型基因引发的溶血性输血反应及严重新生儿溶血病的SNP位点，在Intron6末端靠近Exon7剪切位点存在940‑3CG的纯合突变，造成了该RHCE基因Exon7‑Exon10无法正确剪切，从而影响RhC、c、E和e四个抗原在红细胞表面的表达。本发明提供了RHCE变异型基因的新的用途，从而提供了一种有效的针对输血引发的溶血性输血反应及严重新生儿溶血病的快速基因诊断、基因筛查及遗传咨询的途径，应用效果表明本发明所提供的基因的SNP位点及检测引物可以有效的用于临床输血患者及孕产妇外周血进行新的RHCE变异型基因突变位点的快速检测。

技术领域

本发明属于基因诊断制品技术领域，具体涉及一种引发溶血性输血反应和严重新生儿溶血病的RHCE血型基因的SNP位点。

背景技术

2021年2月，ISBT又确认43个的红细胞血型系统，共343个抗原。其中Rh血型是最复杂的血型系统。RHD、RHCE是Rh血型最重要的两个基因，两个基因共编码55个抗原，在临床输血中的重要性仅次于ABO血型系统。

Rh血型抗原对于临床输血意义最大的主要有5个，即RhD、C、c、E和e抗原，其中针对临床输血患者和无偿献血者D抗原检测均为必检项目，有条件的实验室还开展开了RhD阴性抗原的确证实验。

临床上对RhD抗原引起的免疫性输血反应和新生儿溶血病的成功预防，使人们开始关注红细胞上的其他Rh抗原，尤其是与RhD紧密相关的RhCE抗原。临床检出的不则规抗体中，Rh血型系统抗体约占80％，其中抗-E、抗-E合并-c占到约50％，抗体频率依次为抗-E、抗-E合并抗-c、抗-C合并抗-e、抗-C、抗-c、和抗-e。

目前法规未规定医疗机构开展RhC、c、E和e抗原的检测，在需反复输血的患者，如地中海贫血患者、血液系统疾病患者、器官和组织移植患者、慢性消化道出血患者、肾病患者和肿瘤患者、育龄女性、孕产妇在临床输血过程中容易收到免疫刺激，产生抗-C、抗-e、抗-E、抗-c抗体，因此开展Rh血型相容性输血具有重要意义。

为了进一步提高输血安全、加强预防输血引发的溶血性输血反应和胎儿新生儿溶血病(HDFN)，申请人所在的输血科发现的先证者，并委托青岛市中心血站输血研究所进行研究，发现了带有可引发溶血性输血反应和严重新生儿溶血病的RHCE血型基因的SNP位点，并建立了RHCE血型基因全外显子的测序方法，从而促成了本发明。

发明内容

本发明的目的是提供一种引发溶血性输血反应和严重新生儿溶血病的RHCE血型基因的SNP位点，即一种RhCE血型系统变异型血型基因引发的溶血性输血反应及严重新生儿溶血病(HDFN)的SNP位点，该位点位于Exon7剪切区域。

申请人对一个1号染色体P36.2-P34显性遗传的RHCE血型基因变异的先证者进行了测序，找到了该先证者RHCE变异型基因存在遗传上的致病突变，由于在Intron6末端靠近Exon7剪切位点存在nt940-3CG的纯合突变，造成了该RHCE基因Exon7-Exon10无法正确剪切，从而影响RhC、c、E和e四个抗原在红细胞表面的表达。

本发明首先提供一种引发溶血性输血反应和严重新生儿溶血病的RHCE血型基因的SNP位点，所述的SNP位点位于序列为SEQ ID NO：1的核酸片段的第170位，发生CG的突变；即RHCE血型基因编码区域由起始密码子起至第940位碱基(Exon7第1个碱基)上游第3个碱基发生了CG的突变；

其中SEQ ID NO：1的具体序列信息如下：