[发明专利]一种多病毒核酸检测目视微流控芯片及其检测方法

说明书

本发明公开一种多病毒核酸检测目视微流控芯片及其检测方法。所述提取层、分隔层和扩增检测层从上到下依次排列；所述提取层将样本溶液分到多个反应腔中；所述分隔层将提取层与扩增检测层分开；所述扩增检测层针对不同的病毒核酸进行扩增检测。本发明用以解决针对POCT要求不能高效准确、简单快速检测核酸的问题。

技术领域

本发明属于微流控芯片领域，具体涉及一种多病毒核酸检测目视微流控芯片及其检测方法。

背景技术

目前核酸检测已被广泛应于临床医学领域，其步骤主要分为：核酸提取，核酸扩增，核酸检测。传统的核酸检测需要花费大量的时间精力，还依赖严格干净的环境和专业的设备，这限制了核酸即时现场检测(Point-of-Care Testing,POCT)的发展。微流控技术的出现为该问题地解决提供了方案：微流控技术的主要形式为微流控芯片，是将整个分析实验室的功能,包括采样、稀释、加试剂、反应、分离、检测等集成在一块几平方厘米的芯片上进行分析的技术。微流控芯片具有液体流动可控、消耗少、分析快等特点，作为一种新兴的科学技术，发展前景巨大，为医学研究与临床转化作出巨大的贡献。

目前，核酸检测微流控芯片主要有基于PCR和恒温扩增方法的检测技术，基本已经满足集样品处理、扩增、检测于一体的要求，但是多数使用荧光检测，需要专业检测设备进行结果判读，而且由于有背景荧光，阴性样本判读时间长；而且多数芯片只针对单一病原体进行检测，不满足通量上的需求；另外，大多微流控技术需要用额外控制设备来维持通道内稳定的压力差，这些均给POCT高效准确、简单快速的要求造成挑战。

发明内容

本发明提供一种多病毒核酸检测目视微流控芯片及其检测方法，用以解决上述针对POCT要求不能高效准确、简单快速检测核酸的问题。

本发明通过以下技术方案实现：

一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，所述目视微流控芯片包括提取层10、分隔层11和扩增检测层12，所述提取层10、分隔层11和扩增检测层12从上到下依次排列；

所述提取层10将样本溶液分到多个反应腔中；

所述分隔层11将提取层与扩增检测层分开；

所述扩增检测层12针对不同的病毒核酸进行扩增检测。

进一步的，所述提取层10包括提取层反应腔1、提取层稳流段2和提取层储液腔3，所述提取层储液腔3设置在提取层的中心，所述提取层稳流段2均布且连通提取层储液腔3，所述提取层稳流段2连通提取层反应腔1，所述提取层储液腔3中心开有进液口。

进一步的，所述扩增检测层12包括扩增检测层反应腔4、扩增检测层堵塞段通道5和扩增检测层负压口6，所述扩增检测层负压口6设置在扩增检测层的中心，所述扩增检测层堵塞段通道5均布且连通扩增检测层负压口6，所述扩增检测层堵塞段通道5连通扩增检测层反应腔4。

进一步的，所述扩增检测层堵塞段通道的进口处5-1填入直径为30μm的微球；

所述扩增检测层堵塞段通道5的进口直径大于流动通道的直径。

进一步的，提取层反应腔1与扩增检测层反应腔4相连通。

一种多病毒核酸检测目视微流控芯片的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：

步骤1：在扩增检测层反应腔4内预埋入干粉引物；

步骤2：将配置好的反应液通过进液口注入提取层储液腔3内；

步骤3：将注入反应液的目视微流控芯片离心30s，使反应液均分至各个提取层反应腔1；

步骤4：根据步骤1的试剂使用要求进行加热温度循环，完成扩增；

步骤5：完成扩增后，室温冷却60s；