[发明专利]一种多病毒核酸检测目视微流控芯片及其检测方法

权利要求书

1.一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，其特征在于，所述目视微流控芯片包括提取层(10)、分隔层(11)和扩增检测层(12)，所述提取层(10)、分隔层(11)和扩增检测层(12)从上到下依次排列；

所述提取层(10)是样本溶液分到多个反应腔中；

所述分隔层(11)将提取层与扩增检测层分开；

所述扩增检测层(12)针对不同的检测试剂进行扩增检测。

2.根据权利要求1所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，其特征在于，所述提取层(10)包括提取层反应腔(1)、提取层稳流段(2)和提取层储液腔(3)，所述提取层储液腔(3)设置在提取层的中心，所述提取层稳流段(2)均布且连通提取层储液腔(3)，所述提取层稳流段(2)连通提取层反应腔(1)，所述提取层储液腔(3)中心开有进液口。

3.根据权利要求1所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，其特征在于，所述扩增检测层(12)包括扩增检测层反应腔(4)、扩增检测层堵塞段通道(5)和扩增检测层负压口(6)，所述扩增检测层负压口(6)设置在扩增检测层的中心，所述扩增检测层堵塞段通道(5)均布且连通扩增检测层负压口(6)，所述扩增检测层堵塞段通道(5)连通扩增检测层反应腔(4)。

4.根据权利要求3所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，其特征在于，所述扩增检测层堵塞段通道的进口处(5-1)填入直径为30μm的微球；

所述扩增检测层堵塞段通道(5)的进口直径大于流动通道的直径。

5.根据权利要求2或3所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片，其特征在于，提取层反应腔(1)与扩增检测层反应腔(4)相连通。

6.根据权利要求1-5任一所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

步骤1：在扩增检测层反应腔(4)内预埋入干粉引物；

步骤2：将配置好的反应液通过进液口注入提取层储液腔(3)内；

步骤3：将注入反应液的目视微流控芯片离心30s，使反应液均分至各个提取层反应腔(1)；

步骤4：根据步骤1的试剂使用要求进行加热温度循环，完成扩增；

步骤5：完成扩增后，室温冷却60s；

步骤6：用注射器吸取酒精和醋酸铵形成混合溶液酒精：醋酸铵的配比为2：1；

步骤7：将步骤6的混合溶液通过进液口注入提取层储液腔(3)内；

步骤8：再次离心30s，使混合溶液通过提取层稳流段(2)进入到与提取层反应腔(1)连通的扩增检测层反应腔(4)内；

步骤9：用注射器抽取油性有色指示液，通过进液口注入提取层储液腔(3)内；

步骤10：在负压口(6)使用负压产生器抽气，目测扩增检测层堵塞段通道(5)的检测结果。

7.根据权利要求5所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片的检测方法，其特征在于，所述步骤1中配置好的反应液具体为，将待测样本与扩增反应溶液共120μL装入检测试管内，旋涡混合30s，充分混合。

8.根据权利要求5所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片的检测方法，其特征在于，所述步骤8混合溶液进入扩增检测层反应腔(4)内具体为，混合溶液通过进液口注入提取层储液腔(3)内后，通过离心驱动反应体系从提取层储液腔(3)流向扩增检测层反应腔(4)内。

9.根据权利要求5所述一种多病毒核酸检测目视微流控芯片的检测方法，其特征在于，所述步骤8扩增检测层反应腔(4)内的液体混合后，由于乙醇溶液与核酸可形成物理沉淀，且该沉淀直径大于微球堆积的间隙大小，则油性有色指示液可在扩增检测层堵塞段通道(5)目测呈阳性的检测结果。