[发明专利]一种外泌体的纯化方法在审

专利信息
申请号: 202110598146.0 申请日: 2021-05-28
公开(公告)号: CN113403251A 公开(公告)日: 2021-09-17
发明(设计)人: 方杨武;王奕;李东升;于振亚 申请(专利权)人: 微纳核酸生物医药(广东)有限公司
主分类号: C12N5/00 分类号: C12N5/00
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 颜希文
地址: 528031 广东省佛山市禅城*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 外泌体 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种外泌体的纯化方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

(1)将富含外泌体的细胞培养液于9000~11000g离心;

(2)将步骤(1)得到的上清液和碘帕醇溶液一起离心,得到外泌体粗提液,离心时,碘帕醇位于所述步骤(1)得到的上清液下部,离心力为100000~110000g;所述碘帕醇溶液的浓度为40~42%(w/v);步骤(1)得到的上清液和碘帕醇的体积比为500~600:1;

(3)将外泌体粗提液用缓冲溶液稀释4~6倍和外泌纯一起离心,外泌纯位于所述外泌体粗提液下部,离心力为100000~110000g;外泌体粗提液和外泌纯的体积比为2:1~1.2;所述外泌纯为25~30%(w/v)的碘帕醇溶液;

(4)分别收集步骤(3)离心分层后的产物。

2.根据权利要求1所述外泌体的纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)中,缓冲溶液为PBS缓冲液。

3.根据权利要求1所述外泌体的纯化方法,其特征在于,所述步骤(1)中,离心的时间为25~35min。

4.根据权利要求1所述外泌体的纯化方法,其特征在于,所述步骤(2)中,离心的时间为65~75min。

5.根据权利要求1所述外泌体的纯化方法,其特征在于,所述步骤(3)中,离心的时间为65~75min。

6.一种用于外泌体的纯化方法的连续密度梯度介质,其特征在于,所述连续密度梯度介质的制备方法包括以下步骤:将外泌纯在100000g离心力下离心70min。

7.一种用于外泌体的纯化方法的连续密度梯度介质的制备方法,其特征在于,所述连续密度梯度介质的制备方法包括以下步骤:将外泌纯在100000g离心力下离心70min。

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