[发明专利]一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法

说明书

本发明提供一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，包括以下步骤：S1将露兜果、桑椹果预处理，得到露兜果渣和桑椹果渣；S2制备露兜果提取物，经过醇提、二次浸提方法制得露兜果提取物，S3制备桑椹果提取物，使用乙醇溶液浸提，超声条件下制得桑椹果提取物；S4乳酸菌菌悬液配制，S5发酵：将露兜果提取物和桑椹果提取物接种到菌悬液中，调整各配比及发酵条件，得到得到乳酸菌发酵液，S6乙醇萃取，得到高活性的乳酸菌发酵提取液，本发明的乳酸菌发酵提取液在高温、酸碱条件下具有较高的活性，活菌数值高，能应用于日用品、化妆品领域中，可作为抗氧化剂、皮肤调理剂，改善皮肤微生态，对皮肤起到抗氧化、抗衰老的作用。

技术领域

本发明涉及生物发酵领域，特别涉及一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法。

背景技术

乳酸杆菌、双歧杆菌等益生菌类巳广泛应用于食品工业中，目前认为这些细菌不仅对人体建康没有任何危害，而且对人体具有保健作用，能够改善宿主肠道内微生物的平衡，促进肠道消化吸收，提高免疫力功能。

专利“一种复合乳酸菌发酵风味的原味乳酸菌饮料及其制备方法”公开号：CN107712047A，通过添加复配稳定剂、复配糖等进行发酵，但是乳酸菌发酵的主要活性物质含量较低；

专利“乳酸菌发酵物及含有该发酵物的发酵乳食品”，公开号：CN102206598B，该发明乳酸菌发酵物通过在培养基中培养乳酸菌而得到，所述培养基含有选自由米糠、柿叶、紫苏、蕺菜、杜仲、姜黄、丁香、肉桂和甜茶组成的组中的至少一种以上的食品原料的萃取物。目前的乳酸菌发酵方法，为了保持乳酸菌的有用性或有效性，不仅要促进菌的增殖，还要抑制乳酸菌发酵物中菌的死亡，提高存活性。因而为了促进乳酸菌的增殖而添加的物质或为了改善乳酸菌的存活性而混合的物质以获得充分的效果时，这些物质使用得越多就越会影响产品的品质，并且也会导致乳酸菌发酵物在耐酸耐碱耐高温等性能下降。因此即使能维持含有大量活乳酸菌的状态，也无法维持乳酸菌的活性，更无法在极端条件下维持乳酸菌的活性。

发明内容

鉴于此，本发明提出一种高活性的乳酸菌发酵提取液及制备方法，解决上述问题。

本发明的技术方案是这样实现的：一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法：包括以下步骤：

S1、选择露兜果、桑椹果洗净，分别粉碎，加入露兜果、桑椹果质量和的0.1～0.5％抗氧化剂榨汁，经120～150目过滤，取滤渣，得到露兜果渣和桑椹果渣；

S2、制备露兜果提取物：将S1得到的露兜果渣，先使用60～80wt％乙醇溶液进行第一次醇提1～3h，再于70～90wt％乙酸乙酯溶液进行第二次浸提0.5～2h，合并提取液，减压浓缩，纯化后干燥，制得露兜果提取物；

S3、制备桑椹果提取物：将S1得到的桑椹果渣用80～100wt％乙醇溶液浸提10～24h，然后在20～60℃条件下在20～50KHz频率超声波下提取0.5～1h，纯化后干燥，制得桑椹果提取物；

S4、乳酸菌菌悬液配制：将乳酸菌以8～12％(v/w)的接种量接种于MRS培养基中，在温度30～35℃、搅拌转速为100～150rpm的条件下培养30～50小时，取培养液于3000～5000rpm下离心，离心后的菌悬液备用；

S5、发酵：将S2得到的露兜果提取物和S3得到的桑椹果提取物按质量比为1～3:0.5的混合搅拌，得到混合物提取物；将混合物提取物接种至菌悬液中，在20～30℃下发酵25～48h，得到乳酸菌发酵液；

S6、提取：将S5得到的乳酸菌发酵液用超声波破坏细胞壁，再用乙醇萃取2～4次，合并提取液，浓缩，纯化干燥，得到高活性的乳酸菌发酵提取液。

进一步的，所述S1的抗氧化剂由质量比为0.1～0.5:2～5:1.3～2的百里香酚、香芹酚、香豆素混合制得。

进一步的，所述S2中露兜果渣与乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:20～45。