[发明专利]一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法

权利要求书

1.一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、选择露兜果、桑椹果洗净，分别粉碎，加入露兜果与桑椹果总质量的0.1～0.5％抗氧化剂榨汁，经120～150目过滤，取滤渣，得到露兜果渣和桑椹果渣；

S2、制备露兜果提取物：将S1得到的露兜果渣，先使用60～80wt％乙醇溶液进行第一次醇提1～3h，再于70～90wt％乙酸乙酯溶液进行第二次浸提0.5～2h，合并提取液，减压浓缩，纯化后干燥，制得露兜果提取物；

S3、制备桑椹果提取物：将S1得到的桑椹果渣用80～100wt％乙醇溶液浸提10～24h，然后在20～60℃条件下在20～50KHz频率超声波下提取0.5～1h，纯化后干燥，制得桑椹果提取物；

S4、乳酸菌菌悬液配制：将乳酸菌以8～12％(v/w)的接种量接种于MRS培养基，在温度30～35℃、搅拌转速为100～150rpm的条件下培养30～50小时，取培养液于3000～5000rpm下离心，离心后的菌悬液备用；

S5、发酵：将S2得到的露兜果提取物和S3得到的桑椹果提取物按质量比为1～3:0.5的混合搅拌，得到混合物提取物；将混合物提取物接种至菌悬液中，在20～30℃下发酵25～48h，得到乳酸菌发酵液；

S6、提取：将S5得到的乳酸菌发酵液用超声波破坏细胞壁，再用乙醇萃取2～4次，合并提取液，浓缩，纯化干燥，得到高活性的乳酸菌发酵提取液。

2.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S1的抗氧化剂由质量比为0.1～0.5:2～5:1.3～2的百里香酚、香芹酚、香豆素混合制得。

3.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S2中露兜果渣与乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:20～45。

4.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S2中露兜果渣与乙酸乙酯溶液的质量体积比g/mL为1:25～35。

5.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S3中桑椹果渣与乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:18～35。

6.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S4的乳酸菌为乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌或罗伊氏乳杆菌中的一种。

7.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S5中混合物提取物与菌悬液质量体积比g/mL为1:5～15。

8.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S6中乳酸菌发酵液与乙醇的体积比为2～4：1。

9.如权利要求1所述的一种高活性的乳酸菌发酵提取液的制备方法，其特征在于：所述S6中萃取温度40～55℃、萃取压力0.3～0.5Mpa、萃取时间30～50min。