[发明专利]一种特异性识别PD-L1的纳米抗体及其应用

权利要求书

1.一种特异性识别PD-L1的纳米抗体，所述纳米抗体的互补决定区包括如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列CDR1、SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列CDR2和SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列CDR3。

2.如权利要求1所述的一种特异性识别PD-L1的纳米抗体,其特征在于，所述纳米抗体的骨架区包括如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列FR1、SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列FR2、SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列FR3和SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列FR4。

3.如权利要求2所述的一种特异性识别PD-L1的纳米抗体,其特征在于，所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.一种多核苷酸，其特征在于，其编码权利要求1~3任一所述的纳米抗体。

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体中包括权利要求4所述的多核苷酸。

6.如权利要求5所述的一种表达载体，其特征在于，所述表达载体为pET28a。

7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞内包括权利要求5~6任一所述的表达载体，或其基因组中整合有权利要求4所述的多核苷酸。

8.如权利要求7所述的一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌。

9.一种纳米抗体噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的表面包括权利要求1~3任一所述的纳米抗体。

10.一种用于检测PD-L1的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1~3任一所述的纳米抗体或权利要求9所述的纳米抗体噬菌体。

11.如权利要求10所述的一种用于检测PD-L1的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括固相载体，所述的纳米抗体或纳米抗体噬菌体被固定于固相载体中。

12.如权利要求11所述的一种用于检测PD-L1的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括能与所述的纳米抗体连接的可检测标记物，所述的可检测标记物被连接于所述的纳米抗体或分离地存在于试剂盒中；和/或PD-L1标准品或PD-L1偶联物标准品；和/或与可检测标记物相对应的底物；和/或酶联免疫反应试剂。

13.一种用于非疾病诊断和治疗目的的检测待测样品中PD-L1存在情况的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、以权利要求1~3任一所述的纳米抗体或权利要求9所述的纳米抗体噬菌体作为PD-L1的检测抗体，通过酶联免疫反应法来检测待测样品中PD-L1的存在情况。

14.如权利要求13所述的一种用于非疾病诊断和治疗目的的检测待测样品中PD-L1存在情况的方法，其特征在于，所述步骤S1中，具体包括以下步骤：将待测样品包被于固相载体上，以携带或不携带可检测标记物的所述的纳米抗体或所述的纳米抗体噬菌体作为检测抗体，检测PD-L1的存在情况。

15.一种免疫缀合物，其特征在于，包括治疗剂和与所述治疗剂缀合的如权利要求1~3任一所述的纳米抗体，所述治疗剂包括放射性同位素或药物。

16.一种双特异性抗体，其特征在于，包括权利要求1~3任一所述的纳米抗体，以及与所述纳米抗体功能性连接的具有另一种抗原结合特性的抗体或抗体片段。

17.一种药用组合物，其特征在于，包括权利要求1~3任一所述的纳米抗体，以及可药用赋形剂、载体或稀释剂。