[发明专利]细胞分离和富集一体化装置及方法有效
申请号: | 202110590385.1 | 申请日: | 2021-05-28 |
公开(公告)号: | CN113462532B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | 王玮;许清梅 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12 |
代理公司: | 北京辰权知识产权代理有限公司 11619 | 代理人: | 王志红 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 分离 富集 一体化 装置 方法 | ||
1.一种采用一体化装置进行细胞分离和富集的方法,其特征在于,所述一体化装置包括:
样本过滤杯,所述样本过滤杯的顶端开设有进液口,所述样本过滤杯的底端开设有出液口;
过滤杯密封盖板,盖设在所述进液口处;所述过滤杯密封盖板与所述样本过滤杯螺接或卡接;还包括第一密封垫圈,所述样本过滤杯的顶端开设有用于放置所述第一密封垫圈的第一凹槽;
样本过滤嘴,与所述样本过滤杯可拆卸连接,所述样本过滤嘴的顶端与底端均开设有开口,且所述样本过滤嘴的顶端开口与所述出液口连通;
微孔滤膜,位于所述出液口与所述样本过滤嘴的底端开口之间;
过滤嘴密封器件,与所述样本过滤嘴的底端连接,用于封堵所述样本过滤嘴的底端开口;
所述过滤杯密封盖板上开设有用于放置磁铁的磁铁放置槽;
所述方法包括以下步骤:将血样自进液口倒入所述样本过滤杯内;
采用过滤嘴密封器件封堵所述样本过滤嘴的底端开口,并向所述样本过滤杯添加释放缓冲液,将过滤杯密封盖板盖设在所述进液口处,并对整个装置进行旋转和振荡,使微孔滤膜上俘获的细胞释放至释放缓冲液中;
打开过滤杯密封盖板,并向样本过滤杯中添加免疫磁珠缓冲液,再盖上过滤杯密封盖板进行孵育,孵育过程中进行旋转、振荡;
将磁铁放置于磁铁放置槽,将一体化装置倒置并静置,直至免疫磁珠和白细胞的混合物被吸附至过滤杯密封盖板上;
更换一张相同孔径且未经修饰的微孔滤膜,再次翻转一体化装置,依次打开过滤嘴密封器件和过滤杯密封盖板,对含有稀有细胞的上清液进行二次过滤。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述样本过滤嘴的顶端与所述样本过滤杯的底端螺接或卡接。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述过滤嘴密封器件呈空心柱状体,且所述过滤嘴密封器件的顶端具有开口,所述样本过滤嘴的底端自所述过滤嘴密封器件顶端的开口插入所述过滤嘴密封器件内,并与所述过滤嘴密封器件螺接。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,还包括第二密封垫圈,所述过滤嘴密封器件的内底面开设有用于放置所述第二密封垫圈的第二凹槽。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述过滤嘴密封器件呈板状,所述过滤嘴密封器件与所述样本过滤嘴的底端开口扣合。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,所述微孔滤膜的孔径为6-12μm。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述微孔滤膜的上表面形成有修饰层,所述修饰层的材质选自聚乙烯醇、海藻酸凝胶、明胶、胶原中的任一种。
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