[发明专利]一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法

权利要求书

1.一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法，其特征在于：所述该载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法，其特征在于：所述该载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，该载体通过下列步骤制备获得：

1)、获得目的序列复制子元件(BeSRL)，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：3所示，具体地，该目的序列通过以下步骤制备获得：

(1)、利用XbaⅠ对SEQ ID NO：1所示的pRGEB32-GhU6.7-NPTⅡ(序列表SEQ ID NO：1)载体进行酶切；

(2)、与复制子序列元件BeSRL目的序列进行连接；

(3)、通过测序验证，得到如SEQ ID NO：4所示的适用于陆地棉的基因敲入的基础载体BeYDV-pRGEB32-1；

2)、获得目的序列复制子元件(ULIR)，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：5所示，具体地，该目的序列通过以下步骤制备获得：

(1)、Afe I对SEQ ID NO：4所示的BeYDV-pRGEB32-1载体进行酶切；

(2)、与复制子序列元件BeSRL目的序列进行连接；

(3)、通过测序验证，得到如SEQ ID NO：2所示的适用于陆地棉的基因敲入的高效转化载体BeYDV-Cas9。

3.根据权利要求1或2所述的一种适用于陆地棉的基因精准高效编辑的方法，其特征在于：所述的载体BeYDV-Cas9在陆地棉基因组编辑中的应用。