[发明专利]丙烯酰胺-赖氨酸加合物及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了丙烯酰胺‑赖氨酸加合物及其制备方法与应用，属于食品检测技术领域。制备方法为：在水中，将丙烯酰胺与赖氨酸进行避光加热反应，获得丙烯酰胺‑赖氨酸加合物。本发明的制备方法可以得到两种丙烯酰胺‑赖氨酸加合物，制得的产品产率高，能够用于丙烯酰胺的消除，且制备得到的加合物纯度均高达98％以上，可用其作为标准物质检测食品中的丙烯酰胺‑赖氨酸加合物。

技术领域

本发明涉及有机合成技术领域，特别是涉及丙烯酰胺-赖氨酸加合物及其制备方法与应用。

背景技术

丙烯酰胺是一种公认的神经毒素和潜在的致癌物，具有生殖毒性和免疫毒性。动物试验研究发现，丙烯酰胺可致大鼠多种器官肿瘤，包括乳腺、甲状腺、睾丸、肾上腺、中枢神经、口腔、子宫、脑下垂体等。急性毒性试验结果表明，大鼠、小鼠、豚鼠和兔的丙烯酰胺经口LD₅₀为150-180mg/kg，属中等毒性物质。

自瑞典国家食品管理局和瑞典斯德哥尔摩大学的研究人员首次测出了油炸和焙烤淀粉类食品中的丙烯酰胺以来，研究人员相继在各种日常食品，如咖啡、面包、薯片、饼干中发现了大量的丙烯酰胺。研究表明：食品中的丙烯酰胺主要由天冬酰胺与活泼羰基化合物(还原糖、羟羰基、二羰基、烷二烯、5-羟甲基糠醛等)在高温加工中通过美拉德反应产生。研究表明，氨基酸可与丙烯酰胺发生迈克尔加成反应，从而消减模拟体系中的丙烯酰胺；而以马铃薯粉和面粉制作的食品在经过高温加工后，原料中的氨基酸(赖氨酸，γ-氨基丁酸，甘氨酸，丙氨酸，精氨酸等)含量随着加热时间的延长而显著降低，这很可能因为高温加工过程中氨基酸与丙烯酰胺发生反应，从而遮盖了食品中丙烯酰胺的暴露水平。为了更客观地评估食品中丙烯酰胺的暴露水平，有必要了解丙烯酰胺形成后与食品中组分发生的变化，因此，提供一种纯度高、能够用于监测食品中丙烯酰胺与氨基酸反应的标准物，以实现准确分析食品中丙烯酰胺加成物的含量是目前需要解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种丙烯酰胺-赖氨酸加合物的制备方法，以解决上述现有技术存在的问题，使丙烯酰胺-赖氨酸的产率高、纯度高。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明的目的之一是提供一种丙烯酰胺-赖氨酸加合物的制备方法，包括以下步骤：在水中，将丙烯酰胺与赖氨酸进行避光加热反应，获得丙烯酰胺-赖氨酸加合物1和/或2；

所述加合物1的相对分子质量为217.1490，分子式为C₉H₁₉N₃O₃，结构式为：

所述加合物2分子式为：C₁₂H₂₄N₄O₄，分子量：289.1870，结构式为：

进一步地，所述丙烯酰胺与赖氨酸的摩尔比为1：(1～16)。

进一步地，所述避光加热反应的温度为40～80℃，时间为2.5～6h。

进一步地，避光加热反应完成后还包括后续处理的步骤：将反应后的体系浓缩，滤膜过滤，反相硅胶层析法及制备液相进行纯化，获得纯化后的产物。

进一步地，采用反相硅胶层析法进行纯化时，选用反相硅胶ODS树脂，采用2％甲醇，98％水溶液进行洗脱；制备纯化的条件为：制备柱：Pntulips QC-C18，10×250mm，5μm；2％甲醇：98％水做流动相。

反相硅胶层析法纯化时，结合采用茚三酮显色法和碘蒸气显色法确定收集目标产物，并用液相色谱法(HPLC法)检测纯度，收集目标加合物，冷冻干燥，冷冻干燥条件为-70～-40℃，1～100Pa，36h；

制备纯化后进行冷冻干燥处理，冷冻干燥条件为-70～-40℃，1～100Pa，48h。