[发明专利]Scl-70抗体或其结合片段、其筛选方法及包含其的检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种Scl‑70抗体或其结合片段、其筛选方法及包含其的检测试剂盒，属于体外诊断试剂技术领域。所述抗体或结合片段包含选自2D6或2E6的互补决定区CDR氨基酸序列。相比于现有技术，具有高效价、高准确性及稳定性好的特点，所述Scl‑70抗体或其结合片段可作为Scl‑70抗体检测试剂盒的定标品/阳性对照品/质控品的原料来源。

技术领域

本发明涉及Scl-70抗体检测领域，具体而言，涉及一种Scl-70抗体或其结合片段、其筛选方法及包含其的检测试剂盒。

背景技术

Scl-70，即人DNA拓扑异构酶I的C末端片段的70kD分子量蛋白，因为其抗原分子量为70KD而得名，存在两种DNA拓扑异构酶，I型和II型，I型切割单链DNA，而II型切割双链DNA。Scl-70抗体识别的抗原是DNA拓扑异构酶I，主要为IgG，IgM，IgA较少见。Scl-70抗体见于多种自身免疫病，是系统性硬化症（Systemic sclerosis，SSc）相对特异性的抗体，其阳性常与弥漫性皮肤病变、近端皮肤累及、心脏受累、并发肿瘤及肺间质纤维化密切相关，被认为是预后不良的指标。检测Scl-70抗体可提高SSc的诊断率，有利于SSc的鉴别诊断和治疗效果的提高。

Scl-70抗体检测方法主要有定性检测法及定量检测法，在定性检测法中，需要用到阳性对照品对检测结果进行阴/阳性的判定。在定量检测法中，则需要用到一系列不同浓度的Scl-70抗体作为定标品对检测结果进行定量赋值。

目前，商品化的Scl-70抗体检测定标品来源较少，各厂家自制的定标品主要为病人血清。病人血清存在来源不固定，产量有限，特异性不高，各批次性能不稳定的问题。因此，急需开发出一种来源广，效价高，稳定性好的Scl-70抗体用于Scl-70抗体的检测。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种Scl-70抗体或其结合片段、其制备方法及包含其的检测试剂盒，以解决现有技术中的Scl-70抗体来源少，效价低及稳定性不佳的问题。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种Scl-70抗体或其结合片段，包含轻链可变区VL和/或重链可变区VH，所述VL包含一具有式FRL1-CDRL1-FRL2-CDRL2-FRL3-CDRL3-FRL4的氨基酸序列，其中，CDRL1由SEQ ID NO:8组成，CDRL2由SEQ ID NO:10或29组成，CDRL3由SEQ ID NO:12组成；所述VH包含一具有式FRH1-CDRH1-FRH2-CDRH2-FRH3-CDRH3-FRH4的氨基酸序列，其中CDRH1由SEQ ID NO:15组成，CDRH2由SEQ ID NO:17或36组成，CDRH3由SEQ ID NO:19或38组成。

进一步地，所述Scl-70抗体或其结合片段，所述CDRL2、CDRH2及CDRH3选自以下组别1-5中任一组所示的氨基酸序列：

1）CDRL2选自SEQ ID NO:10，CDRH2选自SEQ ID NO:17，CDRH3选自SEQ ID NO:19；

2）CDRL2选自SEQ ID NO:29，CDRH2选自SEQ ID NO:36，CDRH3选自SEQ ID NO:38；

3）CDRL2选自SEQ ID NO:10，CDRH2选自SEQ ID NO:36，CDRH3选自SEQ ID NO:38；

4）CDRL2选自SEQ ID NO:29，CDRH2选自SEQ ID NO:17，CDRH3选自SEQ ID NO:19；

5）CDRL2选自SEQ ID NO:10，CDRH2选自SEQ ID NO:17，CDRH3选自SEQ ID NO:38。