[发明专利]MALDI-TOF MS检测生殖道病原体的检测产品及用途

说明书

本发明提供一种用于飞行时间质谱法检测8种生殖道病原菌及两种人乳头瘤病毒分型特定位点的引物组、产品及非诊断检测方法，所述生殖道病原菌包括金黄色葡萄球菌、B族链球菌、淋病奈瑟菌、阴道加德纳菌、白色念珠菌、生殖支原体、解脲支原体、沙眼衣原体以及HPV16、HPV18病毒分型。本发明首次提出利用多重PCR结合临床质谱实现对10种生殖道病原体的检测提供新的方法，并综合了多重PCR、单碱基延伸、质谱检测等技术为一体，既可通过PCR技术放大检测模板，又可通过质谱技术检测微量样本，综合了两种技术的优点，远远优于单独使用PCR检测病原体特定片段，具有较高的检测灵敏度。

技术领域

本发明属于分子生物学检测领域，涉及一种利用激光飞行时间质谱技术快速鉴定10种生殖道病原体的的检测产品及用途。

背景技术

据世界卫生组织最新调查报告显示，对于成年女性而言，最常见的疾病不是感冒，而是生殖道感染，患病几率高达90％以上；最常见的不适症状不是发热、咳嗽、头痛等，而是阴部瘙痒、异味、疼痛，以及尿频，尿急等。而且女性许多其它疾病的发生也与生殖系统的功能异常密切相关，如骨质疏松、冠心病、糖尿病、黄褐斑等。从某种意义上讲，生殖系统的问题关乎女人一生的健康和幸福，也可以说是女人的“百病之源”。女性生殖道感染是发生在女性从外阴口至子宫这段腔道因细菌、病毒、寄生虫等病原微生物引起的感染性疾病，主要包括阴道炎(念珠菌性、滴虫性、老年性、细菌性阴道病)、淋病、宫颈炎(息肉、那氏囊肿)、盆腔炎等，是妇女的常见病，几乎每个成年女性和部分少女都曾有过。女性生殖道感染具有患病率高、无症状比例高、不就诊的比例高和得不到合理治疗比例高的特点，导致各种严重并发症和后遗症。女性生殖健康水平直接影响着人口素质，不容忽视。女性生殖道感染已经成为全球范围内危害严重的重要传染病之一。女性生殖感染相关因素由于女性生殖道因解剖、生理、性活动、分娩和卫生习惯等多种因素影响，易发生多种感染。

生殖道感染是妇科常见疾病，由细菌、病毒、白色假丝酵母菌、原虫、支原体、衣原体等多种病原体的侵袭所致，包括女性下生殖道的外阴炎、阴道炎、宫颈炎和上生殖道的盆腔炎性疾病。生殖道感染具流行范围广、复发率高、就诊率低的特点，是最常见的妇科疾病，国内患病率高达42.9％。生殖道感染若得不到及时诊断和正确治疗，可增加性传播疾病感染的风险，会引起异常子宫出血、不孕症、异位妊娠、慢性盆腔痛、流产、胎膜早破、早产、死胎、死产及先天性感染等并发症及后遗症，不仅危害妇女健康，还可危害胎儿及新生儿。生殖道感染已成为严重影响女性健康的社会公共卫生问题，给家庭及社会带来严重负担。

生殖道微生物菌群种类繁多，协调共生、相互制约，可以与宿主发生一系列复杂的相互作用，显著影响生殖道的生理机能和免疫功能，并在抵御机会性病原体的定植过程中发挥“第一道防线”作用。生殖道微生态环境的不平衡可导致女性趋向于发生各种妇科疾病，如阴道炎症、不孕不育、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌等等。阴道炎可由一种病原体所致，单纯的病原体诊治相对简单，但我国阴道炎中有50％左右为混合性感染，利用生殖道微生态系统检测有利于精准诊治阴道混合性感染。近年来，随着女性不孕症的患病率逐年升高，不孕症越来越受到人们的关注。不孕症的发病机制复杂，其中女性生殖道微生物群落失衡与女性不孕不育密切相关。通过临床检测与评价女性阴道微生态平衡，对于女性不孕不育的诊治具有重要意义。高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是医学上公认的宫颈癌发生的主要原因和必要条件，其中HPV16和HPV18的感染与宫颈癌的发病密切相关。但感染HPV后仅5％-10％最终发展为宫颈癌前病变甚至宫颈癌。目前发现，生殖道微生态的不平衡可能是造成HPV持续感染继而发生宫颈病变的协同因素。重建及保护生殖道微生态平衡，尤其是维持乳杆菌为主、阴道正常的酸性环境，为HPV感染及相关宫颈疾病治疗提供研究的新方向。

生殖道病原体是人体重要的微生态体系之一，它们与宿主、环境之间构成了相互制约、相互协调的微生态平衡，这种动态平衡在维护女性生殖道健康中起到关键作用。女性生殖道病原体包括金黄色葡萄球、溶血性链球菌、淋病奈瑟菌、B族链球菌、大肠埃希菌、阴道加德纳菌、白色假丝酵母菌、支原体、沙眼衣原体和HPV等。