[发明专利]一种绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法、试剂盒和应用

权利要求书

1.一种绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

以待测绵羊基因组DNA为模板，利用PCR扩增包含绵羊PDGFD基因内含子区插入/缺失多态性位点，将扩增产物进行电泳分型，根据电泳结果鉴定对应插入/缺失多态性位点的基因型；所述插入/缺失多态性位点选自绵羊PDGFD基因NC_040266.1:g.3876993-3877010位18-bp indel多态性位点。

2.根据权利要求1所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：所述插入/缺失多态性位点PDGFD采用的PCR扩增引物对为：

上游引物：SEQ NO.1 5’-TCTAACACAAGGCCCTGTCAAT-3’(22nt)；

下游引物：SEQ NO.2 5’-TGATGTACGATTGCAAGATCAGTG-3’(24nt)。

3.根据权利要求1所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：所述PCR采用的反应程序为：95℃预变性5min；94℃变性30s，68℃退火30s，72℃延伸20s，18个循环，每循环后退火温度减1℃；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸20s，25个循环；72℃延伸10min；所述电泳采用质量浓度为3.5％的琼脂糖凝胶。

4.根据权利要求1所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：根据电泳结果，插入/缺失多态性位点有三个基因型II、ID和DD，其中插入/插入基因型II表现为252bp一条带纹，插入/缺失基因型ID表现为252bp和234bp两条带纹，缺失/缺失基因型DD表现为234bp一条带纹。

5.根据权利要求1至4任一项所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法，其特征在于：所述绵羊为澳洲白绵羊。

6.如权利要求1至5任一项所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测方法在绵羊育种的分子标记辅助方面中的应用。

7.绵羊PDGFD基因NC_040266.1:g.3876993-3877010位18-bp插入/缺失多态性位点在绵羊育种的分子标记辅助方面中的应用。

8.一种绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含用于PCR扩增绵羊PDGFD基因NC_040266.1:g.3876993-3877010位18-bp插入/缺失多态性位点的引物对。

9.根据权利要求8所述的绵羊PDGFD基因插入/缺失多态性的检测试剂盒，其特征在于：所述引物对为：

上游引物：SEQ NO.1 5’-TCTAACACAAGGCCCTGTCAAT-3’(22nt)；

下游引物：SEQ NO.2 5’-TGATGTACGATTGCAAGATCAGTG-3’(24nt)。

10.如权利要求8或9所述的检测试剂盒在绵羊育种的分子标记辅助方面中的应用。