[发明专利]一种韭菜迟眼蕈蚊细胞色素P450酶系基因沉默的方法及应用有效
| 申请号： | 202110575414.7 | 申请日： | 2021-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN113308471B | 公开（公告）日： | 2023-02-24 |
| 发明（设计）人： | 陈澄宇;赵云霞;刘莹;曹凯歌;张凯 | 申请（专利权）人： | 江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所;云南省农业科学院农业环境资源研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/53;A01K67/033 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 张梦泽 |
| 地址： | 223000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 韭菜 迟眼蕈蚊 细胞 色素 p450 基因 沉默 方法 应用 | ||
1.一种韭菜迟眼蕈蚊细胞色素P450酶系基因沉默的方法，其特征在于，将细胞色素P450酶系基因的dsRNA与人工饲料混合后喂养韭菜迟眼蕈蚊；
所述细胞色素P450酶系基因包括CYP9J35-like、CYP6FV2-like和CYP3A56-like中的一种或多种；所述CYP9J35-like的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述CYP6FV2-like的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；所述CYP3A56-like的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述韭菜迟眼蕈蚊为幼虫，所述幼虫的龄期为1～4龄。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞色素P450酶系基因的dsRNA由细胞色素P450酶系基因的cDNA体外转录得到。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述dsRNA与人工饲料的混合比例为(10～100)μg:1g。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述喂养的时间为6～72h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，合成所述细胞色素P450酶系基因的cDNA的引物为：
当所述细胞色素P450酶系基因为CYP9J35-like时，所述CYP9J35-like的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述CYP9J35-like的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
当所述细胞色素P450酶系基因为CYP6FV2-like时，所述CYP6FV2-like的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述CYP6FV2-like的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
当所述细胞色素P450酶系基因为CYP3A56-like时，所述CYP3A56-like的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述CYP3A56-like的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。
7.权利要求1～6任一项所述的方法在韭菜迟眼蕈蚊防治中的应用。
8.权利要求1～6任一项所述的方法在降低韭菜迟眼蕈蚊对杀虫剂的抗药性中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述杀虫剂包括吡虫啉、噻虫嗪、毒死蜱和氯氰菊酯中的一种或几种。
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