[发明专利]一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株及其应用

说明书

本发明公开一种白念珠菌减毒菌株，所述白念珠菌减毒菌株为MMS22基因不表达的白念珠菌mms22/mms22缺失株。本发明还公开一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用，所述白念珠菌治疗药物可以通过RNA干扰或者基因重组的方法使MMS22基因不表达制得；或者通过制备MMS22蛋白拮抗剂，使MMS22基因表达的蛋白不发挥作用的方法制得。本发明在制备或筛选白念珠菌治疗药物时，以MMS22基因为治疗靶基因，使MMS22基因不表达的药物、或者以MMS22基因表达的蛋白为拮抗对象；或者以MMS22基因和其他基因共同作为靶基因加以沉默。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株的应用，具体涉及一种白念珠菌减毒菌株、一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用、一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在毒力调控方面的应用。

背景技术

白念珠菌（Candida albicans）是一种最重要的人体条件性致病真菌，广泛存在于正常人口腔、呼吸道、肠道及阴道，一般不致病或仅引起轻微的皮肤或粘膜等浅部感染；但当机体免疫功能下降或正常菌群相互制约失调时，其致病能力增强可引起急性、亚急性或慢性侵袭性真菌感染，造成血液系统、呼吸系统等出现深度重症乃至死亡。据统计，白念珠菌导致的侵袭性感染占所有念珠菌感染的40%以上（Chen M, etal., 2018）。当前，免疫受损人群不断增加、临床抗真菌药物的局限性和真菌耐药性问题依然突出（Fisher M C,etal., 2018），导致白念珠菌仍是威胁人类健康的重要真菌病原。

白念珠菌致病机理主要包括菌体形态转换、黏附素、侵袭酶等（Sellam A, etal.,2016）。其中，菌体形态转换对于致病有重要意义：白念珠菌的菌丝形态对于细胞适应寄生环境获取营养、逃逸宿主免疫细胞的吞噬和杀伤，以及侵入深部组织有重要作用，因而具有重要的致病意义；相反，若抑制菌丝的生成，则可显著降低其细胞毒力。

白念珠菌的菌丝生成与多种环境因素相关，如低氧、血清、营养匮乏等均可诱导菌丝生成。目前发现，菌丝发育主要通过两条信号通路，即cAMP/PKA途径和MAPK途径，其下游转录因子分别为Efg1和Cph1，调控菌丝相关特异性基因如HWP1、UME6等转录。此外，菌丝发育受多种调控因子的调节，如BRG1在其中发挥正调控作用，而NRG1则发挥负调控作用抑制菌丝的生成。

DNA损伤修复蛋白对于细胞应对体内外遗传毒性试剂的胁迫有重要意义，可进一步影响白念珠菌在宿主体内的存活和定植能力，如白念珠菌核酸切除修复蛋白RAD23缺失不影响菌丝生成，却明显降低小鼠感染模型中的细胞毒力（Jia F, et al., 2020）。此外，前期发现部分DNA损伤应答相关基因也参与调控菌丝生成：如缺失白念珠菌RAD4能明显抑制菌丝生成，并导致小鼠感染模型中白念珠菌毒力丧失。而白念珠菌MMS22是前期鉴定的一个DNA损伤修复相关蛋白，但其在白念珠菌致病性调控中的作用尚未知，本发明进一步公布了MMS22调控菌丝生成和致病性的重要作用。

发明内容