[发明专利]一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株及其应用

权利要求书

1.一种白念珠菌减毒菌株，其特征在于，所述白念珠菌减毒菌株为MMS22基因不表达的白念珠菌mms22/mms22 缺失株。

2.根据权利要求1所述的一种白念珠菌减毒菌株，其特征在于，所述白念珠菌减毒菌株通过缺失DNA损伤应答相关基因MMS22制得。

3.根据权利要求2所述的一种白念珠菌减毒菌株，其特征在于，所述白念珠菌减毒菌株可以通过RNA干扰或者基因重组的方法使MMS22基因不表达；或者通过制备MMS22蛋白拮抗剂，使MMS22基因表达的蛋白不发挥作用。

4.一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用。

5.根据权利要求4所述的一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用，其特征在于，所述白念珠菌治疗药物以MMS22基因为靶点，筛选或制备使MMS22基因不表达的药物。

6.根据权利要求4所述的一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在制备或筛选白念珠菌治疗药物方面的应用，其特征在于，所述白念珠菌治疗药物可以通过RNA干扰或者基因重组的方法使MMS22基因不表达制得；或者通过制备MMS22蛋白拮抗剂，使MMS22基因表达的蛋白不发挥作用的方法制得。

7.一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在毒力调控方面的应用。

8.根据权利要求7所述的一种缺失MMS22基因的白念珠菌减毒菌株在毒力调控方面的应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）检测MMS22基因缺失对白念珠菌菌丝发育的影响：将白念珠菌野生型菌株与MMS22缺失株过夜培养后，以1：20比例分别转接到液体YPD+15%血清培养基和Spider培养基中，于37℃继续震荡培养1-2h后，显微镜检缺失株菌丝生成情况；同时，将过夜培养物稀释后，涂布到固体YPD+15%血清培养基和Spider培养基，于37℃静置培养3-5d后，观察菌落形态和浸入生长情况；

（2）检测MMS22缺失的白念珠菌毒性情况：进行大蜡螟幼虫感染实验，分别将10μL 5×10⁵ 白念珠菌野生型菌株和MMS22缺失株细胞注射大蜡螟幼虫，观察存活率情况；

（3）检测MMS22基因缺失对白念珠菌在组织定植的影响：分别将等量白念珠菌野生菌株和MMS22缺失株细胞注射大蜡螟幼虫，分别在5h、24h和48h收集虫体，研磨匀浆后适当稀释涂布YPD平板，30℃培养2天后进行菌落计数。