[发明专利]生物样品中小分子物质检测的前处理试剂在审
申请号: | 202110572013.6 | 申请日: | 2021-05-25 |
公开(公告)号: | CN113419017A | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 耿瑞;蔡克亚;刘亚娟;赵高岭;张学东;孙江彦;高培丽;李宾宾;申业明 | 申请(专利权)人: | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/08 | 分类号: | G01N30/08;G01N30/72 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 温可睿 |
地址: | 450016 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 样品 中小 分子 物质 检测 处理 试剂 | ||
1.生物样品中小分子物质检测的前处理试剂,其包括:磁珠悬液、活化液、重悬液、清洗液和洗脱液;
所述磁珠悬液中磁珠为表面修饰十八烷基的磁珠;
所述活化液为三氯乙酸的水溶液;
所述洗脱液为甲酸、甲醇和水的混合液;
所述重悬液为水,
所述清洗液为水。
2.根据权利要求1所述的前处理试剂,其特征在于,所述磁珠悬液中溶液为纯化水,其中磁珠的密度为10mg/mL。
3.根据权利要求1所述的前处理试剂,其特征在于,所述活化液中三氯乙酸的体积分数为0.1%。
4.根据权利要求1所述的前处理试剂,其特征在于,所述洗脱液中,甲酸、甲醇和水的体积比为0.1:90:10。
5.根据权利要求1~4任一项所述的前处理试剂,其特征在于,其中还包括解离剂,所述解离剂中包括:1.5g/L十二烷基磺酸钠、100g/L二甲基亚砜、50g/L乙醇、0.05M/L Tris-HCl。
6.根据权利要求1~4任一项所述的前处理试剂,其特征在于,其中还包括内标溶液,所述内标溶液为小分子物质的溶液,所述小分子物质包括泊沙康唑、25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3、维生素A、维生素E和/或免疫抑制剂;所述免疫抑制剂为他克莫司、西罗莫司、依维莫司、环孢霉素A、子囊霉素、西罗莫司-d3、依维莫司-d4和/或环孢霉素A-d12。
7.生物样品中小分子物质检测的前处理方法,其特征在于,以权利要求1~6任一项所述的前处理试剂对生物样品进行处理。
8.根据权利要求7所述的前处理方法,其特征在于,所述生物样品为血液;所述小分子物质为泊沙康唑、25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3、维生素A、维生素E和/或免疫抑制剂;所述免疫抑制剂为他克莫司、西罗莫司、依维莫司、环孢霉素A、子囊霉素、西罗莫司-d3、依维莫司-d4和/或环孢霉素A-d12。
9.根据权利要求8所述的前处理方法,其特征在于,包括:
将所述磁珠以所述活化液活化后,以超纯水重悬,得到磁珠工作液;
将血液与所述磁珠工作液混合,孵育后分离磁珠;
磁珠经超纯水清洗后,以洗脱液洗脱,然后取上清液;
所述磁珠工作液中.0.,磁珠的密度为10mg/mL;
所述血液与磁珠工作液的体积比为(10~100):100;
所述孵育为室温孵育2~5min;
所述磁珠与洗脱液的质量-体积比为1mg:100μL。
10.根据权利要求9所述的前处理方法,其特征在于,还包括
血液与磁珠混合前,将血液以所述解析剂进行解析;
所述血液与解析剂的体积比为1:2;所述解析的条件为37℃,30min。
11.一种血液中小分子物质的检测方法,其特征在于,包括:
以权利要求6~9任一项所述的前处理方法对血液进行处理后,以LC-MS/MS的液相色谱进行检测。
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