[发明专利]一种组织中游离血红素的检测试剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种组织中游离血红素的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂由3,3',5,5'-四甲基联苯胺，二甲基亚砜，过氧化氢，4-甲氧基喹啉，聚乙二醇400，羧甲基纤维素，二丁基羟基甲苯、缓冲液和水制成，所述缓冲液为浓度20mM的柠檬酸钠缓冲液，其余组分质量百分比如下：

3,3',5,5'-四甲基联苯胺：0.005％-0.015％；

二甲基亚砜：1％-10％；

过氧化氢：0.015％-0.025％；

4-甲氧基喹啉：0.012％-0.024％；

聚乙二醇400：5％-15％；

羧甲基纤维素：0.25％-0.5％；

二丁基羟基甲苯：0.01％-0.02％；

余量为水。

2.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述柠檬酸钠缓冲液的pH为5.4-5.6。

3.权利要求1所述的检测试剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

先按质量百分比称取各组分，再用二甲基亚砜先将3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶解，再加入聚乙二醇，混匀，往后依次加入羧甲基纤维素、二丁基羟基甲苯、4-甲氧基喹啉、过氧化氢、柠檬酸钠缓冲液和水，混合均匀。

4.权利要求1所述的检测试剂在检测组织中游离血红素中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

将加入肝素钠的人全血离心后，吸出血清后混匀，加入2-3倍体积的氧化钠注射液，吹打混匀，并离心，再加入2-3倍体积的氧化钠注射液，混匀后离心，并重复2遍；离心后，吸出上清液，留下压积血，并洗涤，保留红细胞，将红细胞吸出100uL与9.9mL红细胞保存液混合；

将混合后的红细胞保存液静置10min，取上清100uL，将上清和权利要求1的检测试剂按照1：1的体积比混合，静置10分钟，检测620nm的吸光值，与原血红素标准品的吸光值进行对比，即可得出血红素的浓度。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所有离心参数均为：150g，5min。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述红细胞保存液由以下组分混合制备而成：

质量百分比0.005％-0.01％的甲基异噻唑啉酮，浓度为20mM的柠檬酸钠缓冲液，质量百分比2％-3％的无水葡萄糖，质量百分比0.02％-0.03％的腺嘌呤，余量为水。