[发明专利]可提高芽孢杆菌核苷产量的突变体及其应用

权利要求书

1.可提高芽孢杆菌核苷产量的突变体，其特征在于，其包括：

1）磷酸核糖基甲酰基甘氨酰胺合酶突变体，其在野生型序列如SEQ ID NO .2或SEQ IDNO .6所示的磷酸核糖基甲酰基甘氨酰胺合酶的基础上，第444位丝氨酸突变为苯丙氨酸；和/或，

2）酰胺基磷酸核糖基转移酶突变体，其在野生型序列如SEQ ID NO .4或SEQ ID NO .8所示的酰胺基磷酸核糖基转移酶的基础上，第312位亮氨酸突变为脯氨酸；

所述芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，编码磷酸核糖基甲酰基甘氨酰胺合酶野生型的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .1或SEQ ID NO .5所示。

3.根据权利要求1或2所述的突变体，其特征在于，编码酰胺基磷酸核糖基转移酶野生型的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO .3或SEQ ID NO .7所示。

4.编码权利要求1-3中任一项所述的突变体的核酸。

5.权利要求1-3中任一项所述的突变体或权利要求4所述的核酸在以下任一方面的应用：

（1）构建生产核苷的芽孢杆菌；

（2）筛选生产核苷的芽孢杆菌；

所述芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。

6.一种芽孢杆菌，其特征在于，其表达权利要求1-3中任一项所述的突变体；和/或，其含有权利要求4所述的核酸；

所述芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。

7.权利要求6所述的芽孢杆菌在生产核苷中的应用；

所述核苷为肌苷、腺苷中的一种或两种。

8.一种生产核苷的方法，其特征在于，包括：培养权利要求6所述的芽孢杆菌，以产生、积累和收集核苷。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，包括：将所述芽孢杆菌接种于种子培养基进行扩繁，然后将扩繁后的培养物转入发酵培养基发酵；

所述种子培养基的配方如下：

葡萄糖20 g/L，酵母粉5 g/L，玉米浆干粉5 g/L，磷酸二氢钾3 g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸亚铁0.02 g/L，硫酸锰0.01 g/L，pH 7.0~7.2；

所述发酵培养基的配方如下：

葡萄糖60 g/L，酵母粉3.5 g/L，磷酸二氢钾3 g/L，硫酸铵25 g/L，硫酸锰0.01 g/L，硫酸镁5 g/L，味精10 g/L，玉米浆干粉15 g/L，碳酸钙25 g/L，pH 7.0~7.2。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述发酵的温度为35-36℃。