[发明专利]鉴别BT-CMS型水稻的引物、试剂盒及应用

权利要求书

1.用于鉴别包台型核质互作雄性不育系水稻的引物，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1所示的BT79-F及如SEQ ID NO.2所示的BT79-R；BT79-F和BT79-R用于扩增BT型核质互作雄性不育系水稻的线粒体嵌合基因Atp6-orf79的特异性序列，所述扩增产物片段长度为521bp；

其中，所述线粒体嵌合基因Atp6-orf79全长1547bp，如SEQ ID NO.3所示，所述BT79-F针对的扩增起始位置为990bp，所述BT79-R针对的扩增起始位置为1469bp；所述特异性序列为所述线粒体嵌合基因Atp6-orf79沿5’至3’端方向第990bp至第1469bp之间的序列。

2.鉴别包台型核质互作雄性不育系水稻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

获取水稻幼苗的DNA样品；

使用权利要求1中所述的BT79-F/BT79-R引物对所述DNA样品进行PCR扩增；

对扩增产物进行电泳分析，若出现521bp大小的单一条带，表明该水稻为BT型核质互作雄性不育系。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述扩增反应为20μL反应体系，其成分为：2μl 10×缓冲液(含25mM MgCl₂)，0.4μl 10mM dNTP，0.8μl BT79-F(10pmol/μl)，0.8μlBT79-R(10pmol/μl)，0.8μl待测样品，0.4μl Taq DNA聚合酶(2U/μl)，加水补足至20μl；

反应程序为：95℃预变性5min；32个循环：95℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸40s；最后72℃延伸8min。

4.一种包括权利要求1所述的引物的试剂或试剂盒。

5.权利要求4所述的试剂或试剂盒的用途，所述用途为下述任一种：

1)在鉴定或者辅助鉴定水稻包台型核质互作雄性不育系中的应用；

2)在区分水稻包台型核质互作雄性不育系与保持系中的应用；

3)在选育水稻包台型核质互作雄性保持系中的应用；

4)预测水稻包台型核质互作雄性表型中的应用；

5)在制备鉴定或辅助鉴定水稻包台型核质互作雄性表型产品中的应用；

6)在制备预测水稻包台型核质互作雄性表型产品中的应用；

7)在选育杂交粳稻中的应用。