[发明专利]一种从牛奶中提取细胞外囊泡的方法

权利要求书

1.一种从牛奶中提取细胞外囊泡的方法，其特征在于，包括：乳清中加入硫酸铵的步骤，所述乳清中加入硫酸铵所得溶液中4℃下硫酸铵饱和度为20%-50%；所述乳清中加入硫酸铵所得溶液于4°C放置12小时后，离心，收集沉淀；所述离心条件为：4°C、5000 xg离心60min；将沉淀重新悬浮于磷酸盐缓冲生理盐水中，得重悬液；

取所述的重悬液，排除直径大于200nm的蛋白，得到细胞外囊泡粗提物；

将细胞外囊泡粗提物使用截留分子量100k、滤膜标称孔径10nm的离心浓缩管在4°C下5000 xg离心1 h。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乳清中加入硫酸铵所得溶液中4℃下硫酸铵饱和度为20%、22%、24%、26%、28%、30%、32%、34%、36%、38%、40%或50%。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述乳清的获得方法包括如下步骤：

1）取脱脂牛奶调整pH为4.6，静置5分钟以上；

2）22°C下5000 xg离心60min。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述脱脂牛奶为经过巴氏杀菌的脱脂牛奶。