[发明专利]一种螺旋藻多肽及其制备方法

说明书

本发明涉及生物提取领域，特别涉及一种螺旋藻多肽及其制备方法，其中，一种螺旋藻多肽的制备方法，将螺旋藻粉与纯化水混匀得到的螺旋藻混悬液依次经破壁提取、离心静置除杂，向得到的螺旋藻水提液，依次加入碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双水解，将经灭酶活的木瓜蛋白酶水解液，离心、过滤取上清液截留分子量200‑3000Da的螺旋藻蛋白酶解液，再经浓缩、干燥得到螺旋藻多肽。该方法依次通过碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双水解得到的螺旋藻多肽对酪氨酸酶抑制活性高，具有抑制黑色素形成的作用。

技术领域

本发明涉及生物提取领域，特别涉及一种螺旋藻多肽及其制备方法。

背景技术

目前酪氨酸酶抑制剂通过抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑色素生成，可用来预防和治疗色素沉着和黑色素瘤等，典型的酪氨酸酶抑制剂有曲酸、多酚类化合物、苯甲醛和苯甲酸脂类衍生物等，已被广泛应用于研究果蔬保鲜剂，化妆品美白剂和生物杀虫剂。

螺旋藻是一种古老的丝状蓝藻，富含藻蓝蛋白、螺旋藻多酚、小分子多

糖等活性成分。螺旋藻提取物在护肤品中有较为广泛的应用，其功效在改善皮肤暗沉、晒黑、色素紊乱等方面受到较多关注。

如期刊《中国食品学报》2019年10月第19卷10期发表的名称为《螺旋藻多糖对酪氨酸的抑制作用及其抗氧化性能》公开了螺旋藻多糖的提取工艺以及螺旋藻多糖对酪氨酸酶具有较好的抑制效果。

又如公告号为CN105853342B，公告日为2019年5月3日，名称为《一种螺旋藻中的多酚提取物在制备酪氨酸酶抑制剂中的用途》，公开了以螺旋藻多酚提取物作为活性成分之一或唯一的活性成分用于制备酪氨酸酶抑制剂；所述螺旋藻多酚提取物的制备方法：采用体积浓度为80％的乙醇提取螺旋藻，得到螺旋藻多酚粗提液，再将螺旋藻多酚粗提液于40℃减压浓缩，冷冻干燥后得到固态的螺旋藻多酚提取物。

但目前关于在螺旋藻中提取的用于抑制酪氨酸酶活性的多肽物质的报道较少，因此有待进一步研究。

发明内容

为解决背景技术中的提到的问题，本发明提供一种螺旋藻多肽的制备方法，将螺旋藻粉与纯化水混匀得到的螺旋藻混悬液依次经破壁提取、离心静置除杂、酶解及分离纯化得到所述螺旋藻多肽；

所述酶解为向离心静置除杂得到的螺旋藻水提液，依次加入碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双水解，所述碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的水解程序之间通过灭酶操作终止水解反应；

所述分离纯化为将木瓜蛋白酶水解液经离心分离得到的液体，截取分子量为200-3000Da的滤液，再经浓缩、干燥得到所述螺旋藻多肽。

在上述方案的基础上，进一步地，所述螺旋藻粉与水的料液质量比为1：8-12。

在上述方案的基础上，进一步地，所述碱性蛋白酶的酶解条件：酶与底物的比例为4％-6％，pH为8.0-8.7，在55-57℃下酶解4-6h；

所述木瓜蛋白酶的酶解条件为酶与底物的比例为3％-5％，调pH为6.0-6.7，在55-57℃下酶解2-4h；

上述酶在各自的酶解条件下，稳定性高，不易变性，底物转变成产物的速度快，酶解效率高，产物主要以低分子的短肽和游离氨基酸为主，使螺旋藻资源得到了充分利用。

较佳地，所述木瓜蛋白酶的酶活力为60万-200万U/g，所述碱性蛋白酶的酶活力不低于20万U/g。

在上述方案的基础上，进一步地，所述碱性蛋白酶水解液及木瓜蛋白酶水解液的灭酶活条件均为在85-90℃水浴15-20min灭酶活。