[发明专利]一种螺旋藻多肽及其制备方法有效
申请号: | 202110560154.6 | 申请日: | 2021-05-21 |
公开(公告)号: | CN113278670B | 公开(公告)日: | 2023-07-28 |
发明(设计)人: | 丘鹰昆;宾雁林;赵大洲;黄君阳 | 申请(专利权)人: | 厦门元之道生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 厦门加减专利代理事务所(普通合伙) 35234 | 代理人: | 李强 |
地址: | 361116 福建省厦门市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 螺旋藻 多肽 及其 制备 方法 | ||
1.一种螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:将螺旋藻粉与纯化水混匀得到的螺旋藻混悬液依次经破壁提取、离心静置除杂、酶解及分离纯化;
所述酶解为向离心静置除杂得到的螺旋藻水提液,依次加入碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双水解,所述碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的水解程序之间通过灭酶操作终止水解反应;
所述分离纯化为将木瓜蛋白酶水解液经离心分离得到的液体,截取分子量为200-3000Da的滤液,再经浓缩、干燥得到所述螺旋藻多肽;
所述碱性蛋白酶的酶解条件:酶与底物的比例为4%-6%, pH为8.0-8.7,在55-57℃下酶解4-6h;
所述木瓜蛋白酶的酶解条件为酶与底物的比例为 3%-5%,调pH为6.0-6.7,在55-57℃下酶解2-4h;
所述碱性蛋白酶水解液及木瓜蛋白酶水解液的灭酶活条件均为在85-90℃水浴15-20min灭酶活;
所述碱性蛋白酶为2709碱性蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:所述螺旋藻粉与纯化水的料液比为1:8-12。
3.根据权利要求1所述的螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:所述破壁处理为将螺旋藻混悬液经均质和超声处理得到粗提液;
所述超声条件为将螺旋藻混悬液置于2-6℃的条件下,以570-580W的超声功率处理20-25min。
4.根据权利要求1所述的螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:所述离心静置除杂为将粗提液管式离心分离,转速为10000-14000r/min,之后在2-6℃下静置沉淀10-15min,取上清液经浓缩得到螺旋藻水提液。
5.根据权利要求4所述的螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:所述螺旋藻水提液的蛋白质含量为2%-4%。
6.根据权利要求1所述的螺旋藻多肽的制备方法,其特征在于:所述分离纯化中的木瓜蛋白酶水解液经离心分离得到的液体,采用硅藻土过滤得到清液,再经50nm陶瓷膜和3000Da超滤膜过滤,封闭超滤杯后,用氮气进行加压,超滤压强为0.25MPa;接着经200Da纳滤膜除杂得到分子量200-3000Da的滤液。
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