[发明专利]一种鉴定稻水象甲特异引物对及其应用在审

专利信息
申请号: 202110553213.7 申请日: 2021-05-20
公开(公告)号: CN113073141A 公开(公告)日: 2021-07-06
发明(设计)人: 张萌;刘一景;令狐芮平;董瑞;李晋 申请(专利权)人: 山西省植物保护植物检疫总站;榆次区农业技术推广中心;平遥县农业农村局
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 代理人: 曹利华
地址: 030001 *** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴定 稻水象甲 特异 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种检测稻水象甲的特异性引物对,其特征在于,由SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物组成。

2.一种用特异性引物对检测稻水象甲的PCR方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)提取待测样品的DNA;

(2)以所述待测样品的DNA为模板,采用权利要求1所述的特异性引物对DNA模板进行PCR扩增;

(3)对上述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,根据电泳检测结果判定样品中DNA模板是否来源于稻水象甲;若电泳结果显示在370bp处有单一DNA条带,则该样品为稻水象甲;若未扩增出370bp的序列片段,则样品为其它物种。

3.如权利要求2所述检测稻水象甲的PCR方法,其特征在于,所述PCR的反应体系:待测样品DNA 1μL;上游引物0.5μL;下游引物0.5μL;2×Taq PCR MasterMixⅡ12.5μL;无菌水10.5μL。

4.如权利要求3所述PCR的反应体系,其特征在于,待测样品DNA的浓度不小于400pg/μL。

5.如权利要求3所述PCR的反应体系,其特征在于,上游引物和下游引物的摩尔浓度为10μM。

6.如权利要求2所述检测稻水象甲的方法,其特征在于,所述PCR的反应条件:95℃3min;95℃30s,59℃45s;72℃30s,共35个循环;72℃2min,4℃保存PCR产物。

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