[发明专利]一种鉴定稻水象甲特异引物对及其应用在审
申请号: | 202110553213.7 | 申请日: | 2021-05-20 |
公开(公告)号: | CN113073141A | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 张萌;刘一景;令狐芮平;董瑞;李晋 | 申请(专利权)人: | 山西省植物保护植物检疫总站;榆次区农业技术推广中心;平遥县农业农村局 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人: | 曹利华 |
地址: | 030001 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 稻水象甲 特异 引物 及其 应用 | ||
1.一种检测稻水象甲的特异性引物对,其特征在于,由SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物组成。
2.一种用特异性引物对检测稻水象甲的PCR方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取待测样品的DNA;
(2)以所述待测样品的DNA为模板,采用权利要求1所述的特异性引物对DNA模板进行PCR扩增;
(3)对上述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,根据电泳检测结果判定样品中DNA模板是否来源于稻水象甲;若电泳结果显示在370bp处有单一DNA条带,则该样品为稻水象甲;若未扩增出370bp的序列片段,则样品为其它物种。
3.如权利要求2所述检测稻水象甲的PCR方法,其特征在于,所述PCR的反应体系:待测样品DNA 1μL;上游引物0.5μL;下游引物0.5μL;2×Taq PCR MasterMixⅡ12.5μL;无菌水10.5μL。
4.如权利要求3所述PCR的反应体系,其特征在于,待测样品DNA的浓度不小于400pg/μL。
5.如权利要求3所述PCR的反应体系,其特征在于,上游引物和下游引物的摩尔浓度为10μM。
6.如权利要求2所述检测稻水象甲的方法,其特征在于,所述PCR的反应条件:95℃3min;95℃30s,59℃45s;72℃30s,共35个循环;72℃2min,4℃保存PCR产物。
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